[發(fā)明專利]β2-微球蛋白檢測試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610050627.7
• 申請日: 2016-01-26
• 公開（公告）號(hào): CN105606822A
• 公開（公告）日: 2016-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陸雪龍;宋高峰;李清華;周裕國
• 申請（專利權(quán)）人: 寧波天康生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/577;G01N33/531
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 林樂飛

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是屬于醫(yī)學(xué)免疫領(lǐng)域，涉及一種免疫檢測試劑，進(jìn)一步說，本發(fā)明涉及β2- 微球蛋白檢測試劑盒。

背景技術(shù)

β2-微球蛋白主要是用于腎功能評(píng)價(jià)及用作非特異性腫瘤標(biāo)志物，尿液濃度增高 血清水平正常則是由于腎小管重吸收減少，見于腎小管疾病如Fanconi綜合癥、Lowe綜合 癥、慢性鉻中毒、急性腎小管壞死、胱氨酸鳥癥、腎移植、急性或慢性腎盂腎炎，而膀胱炎正 常；血清水平增高尿液濃度正常則由于腎小球病過濾率降低，見于急性或慢性腎炎；血清水 平和尿液水平濃度均升高則見于生成增多并超過腎小管重吸收能力，見于惡性腫瘤如肝細(xì) 胞癌、肺癌、胃及結(jié)腸癌、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、慢性淋巴白血病。

診斷方法：β2MG的測定一般采用RIA法、ELISA法與CLlA法、乳膠免疫比濁法等，但 在臨床上多采用乳膠免疫比濁法

血清（含β2mG）+試劑（乳膠抗人β2mG抗體）━━━━抗原抗體復(fù)合物

產(chǎn)生濁度變化,在一定的波長下檢測,其濁度的變化與其含量成正相關(guān)。

目前抗體與乳膠的連接通常使用化學(xué)偶聯(lián)法，其作為R2試劑，非常容易發(fā)生聚結(jié)， 使得試劑質(zhì)量隨著存放時(shí)間的延長而下降。使試劑的穩(wěn)定性差。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明根據(jù)R2試劑穩(wěn)定性不佳，提供了一種方法來克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，使得其 保持質(zhì)量穩(wěn)定，提供了一種靈敏度高，穩(wěn)定性好的β2-微球蛋白檢測試劑盒。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

一種β2-微球蛋白檢測試劑盒，所述的試劑盒包括試劑R1、試劑R2，所述的試劑R1為的 緩沖液；

所述的試劑R2為β2-微球蛋白抗體致敏聚苯乙烯膠乳顆粒與緩沖液的混合物，所述試 劑R2的制備步驟包括：

步驟(1)：在帶有羧基的聚苯乙烯膠乳顆粒中加入乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺，得到 激活的膠乳顆粒；

步驟(2)：將步驟(1)激活的膠乳顆粒和β2-微球蛋白抗體混合，待反應(yīng)結(jié)束后再加入葡 萄糖封閉膠乳微球上未反應(yīng)的基團(tuán)，得到偶聯(lián)抗體的膠乳微球即β2-微球蛋白抗抗體致敏 聚苯乙烯膠乳顆粒，置于緩沖液中。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選：所述β2-微球蛋白抗體致敏聚苯乙烯膠乳顆粒在試劑 R2中的濃度為0.08～0.28克/100ml。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選：所述試劑R1中的緩沖液為PBS緩沖液、Tris緩沖液、甘 氨酸緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液、檸檬酸-磷酸鹽緩沖液、碳酸鹽-碳酸氫鹽緩沖 液、2-嗎啉乙磺酸緩沖液、氯化銨緩沖液中至少一種。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選：所述試劑R2中的緩沖液為PBS緩沖液、Tris緩沖液、甘 氨酸緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液、檸檬酸-磷酸鹽緩沖液、碳酸鹽-碳酸氫鹽緩沖 液、2-嗎啉乙磺酸緩沖液、氯化銨緩沖液中至少一種。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選：步驟(1)中乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺∶聚苯乙烯膠 乳顆粒的重量比為0.5～5∶100。

作為進(jìn)一步優(yōu)選：所述α1-微球蛋白抗抗體包括多克隆抗體或單克隆抗體。

作為進(jìn)一步優(yōu)選：所述步驟（1）中的聚苯乙烯膠乳顆粒其平均粒徑在0.01~0.2mm 之間。本發(fā)明所述試劑盒所采用的檢測原理為膠乳增強(qiáng)免疫透射比濁法，其原理是β2-微球 蛋白抗體的膠乳顆粒，與β2-微球蛋白發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成聚集顆粒，在一定波長下，通過 測定聚集物形成所產(chǎn)生的濁度，即可測出β2-微球蛋白的含量。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

1.本發(fā)明的試劑盒具有檢測簡單而快速、靈敏度高、準(zhǔn)確性好、抗干擾能力強(qiáng)及生產(chǎn)成 本低的優(yōu)點(diǎn)。

2.本發(fā)明采用的β2-微球蛋白檢測方法為膠乳增強(qiáng)免疫比濁法，該方法使得β2-微 球蛋白的檢測更為經(jīng)濟(jì)、方便和快速，適用于絕大多數(shù)醫(yī)院的自動(dòng)生化分析儀，特別是對急 診能實(shí)現(xiàn)快速定量檢測。

具體實(shí)施方式

下面通過實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明，但本發(fā)明不僅僅局限于以下實(shí)施例。

實(shí)施例1：β2-微球蛋白檢測試劑盒的制備

本發(fā)明的試劑盒涉及試劑的主要材料如下：

1.β2-微球蛋白抗體：多克隆抗體（市售）。

2.膠乳：采用直徑為80～200nm帶羧基基團(tuán)的聚苯乙烯膠乳顆粒(市售)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。