[發明專利]一種萬古霉素培養基及制備萬古霉素的方法

有效

• 申請號: 201610046440.X
• 申請日: 2016-01-23
• 公開（公告）號: CN105505833B
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發明（設計）人: 蘆琦;陳曉靜
• 申請（專利權）人: 雅賽利(臺州)制藥有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/02;C12R1/01
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 林樂飛

1.一種萬古霉素培養基，其特征是：包括如下重量份數的組分：

碳源 1.5-5份

氮源 0.05-0.15份

無機鹽 0.15-0.45份

水 90-110份

所述無機鹽包括硫酸鎳、硝酸鐵和氯化鈉，按照重量份，硫酸鎳：硝酸鐵：氯化鈉=0.5-2:0.5-2:1；

還包括重量份為0.04-0.06份的pH調節劑，所述pH調節劑包括磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉，按照摩爾比，磷酸二氫鈉：磷酸氫二鈉=0.15-0.19：1；

所述氮源由尿素、棉籽餅粉和乙酸銨混合而成，按照重量份，尿素：棉籽餅粉：乙酸銨=3-5:1:2-4；

還包括甘氨酸、色氨酸、酪氨酸組成的重量份為0.05-0.1份的氨基酸復合物，按照重量份，甘氨酸：色氨酸：酪氨酸=3-8：1:3-5。

2.根據權利要求1所述的萬古霉素培養基，其特征是：所述碳源選自可溶性淀粉、葡萄糖、麥芽糖中的一種。

3.一種應用如權利要求1所述的萬古霉素培養基的萬古霉素制備方法，其特征是：包括如下步驟：搖瓶種子接種、種子罐萬古霉素培養基培養、發酵罐萬古霉素培養基培養、預發酵液預處理、陶瓷膜過濾、一次納濾、草酸沉淀、一次板框過濾、一次過柱純化、二次納濾、一次結晶、二次板框過濾、活性炭脫色、脫色板框過濾、二次過柱純化、超濾、三次納濾、二次結晶、真空抽濾、晶體溶解、冷凍干燥、打粉包裝，其中

①發酵液的預處理：按照發酵液體積的0.1-0.5%往萬古霉素發酵液加入質量分數為10-20%的鹽酸進行成鹽，攪拌30min得到預處理液；

②草酸沉淀：將一次納濾得到的濃縮液加入草酸沉淀罐，再加入一次納濾得到的濃縮液重量的0.001-0.004%的固體草酸鈉，攪拌30-50min后靜置；

③活性炭脫色：將二次板框過濾得到的一次結晶體加入活性炭脫色罐，加入去離子水溶解，攪拌并加熱，待一次結晶體的溶液沸騰時加入一次結晶體重量的3-6%的活性炭進行脫色30min。

4.根據權利要求3所述的萬古霉素制備方法，其特征是：所述板框過濾中，過濾介質為濾板，所述濾板上預涂有2mm的助濾劑，所述助濾劑為活性炭。

5.根據權利要求3所述的萬古霉素制備方法，其特征是：所述一次結晶和二次結晶過程中均加入晶體重量10倍的有機溶劑進行結晶，所述有機溶劑選用乙醇、丙酮和乙醚中的其中一種，所述一次結晶和二次結晶的起始溫度為35-45℃，終點溫度為0-15℃，降溫速度為1-3℃/min。

6.根據權利要求3所述的萬古霉素制備方法，其特征是：所述晶體溶解步驟為：將真空抽濾得到的二次結晶體加入溶解罐中，加入二次結晶體重量8-12倍的去離子水，攪拌30min至二次結晶體完全溶解形成溶解液。

7.根據權利要求3所述的萬古霉素制備方法，其特征是：所述一次過柱純化采用SP825樹脂，所述二次過柱純化采用HP20SS樹脂。