[發(fā)明專(zhuān)利]一種穩(wěn)定和延續(xù)地衣芽胞桿菌甘露聚糖酶活的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610046416.6 | 申請(qǐng)日： | 2016-01-25 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN105483109B | 公開(kāi)（公告）日： | 2019-03-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 葛菁萍;杜仁鵬;平文祥;趙丹;金曼 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 黑龍江大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N11/08 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N11/08;C12N9/42;C12R1/10 |
| 代理公司： | 北京市誠(chéng)輝律師事務(wù)所 11430 | 代理人： | 朗堅(jiān) |
| 地址： | 150080 黑龍江省*** | 國(guó)省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 甘露聚糖酶 菌體 發(fā)酵 地衣芽胞桿菌 菌體固定化 高產(chǎn)菌株 聚乙烯醇 投入生產(chǎn) 固定化 包埋 研究 | ||
1.一種地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其包括如下步驟：
1)菌體的固定；
2)菌體的發(fā)酵；
其中所述的地衣芽胞桿菌菌體的固定是將地衣芽胞桿菌進(jìn)行聚乙烯醇包埋固定；
所述聚乙烯醇濃度為4％，菌膠比為1:1；
步驟(1)中的聚乙烯醇包埋固定是將冷卻至37℃滅菌后的聚乙烯醇溶液，與菌體迅速混勻，鋪平板，冷凍至-20℃放置固定，反復(fù)凍融三次后，凍融方法為冷凍24h后取出平板，室溫下溶解30min再冷凍24h，切成小塊，再用無(wú)菌生理鹽水沖洗，即得到固定化細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中菌體的發(fā)酵是以0.1％-1.5％的魔芋粉加入量，將1-10％的固定化菌體接入100mL/250mL魔芋粉發(fā)酵培養(yǎng)基，搖床振蕩增殖、發(fā)酵。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中菌體的發(fā)酵魔芋粉加入量是0.5-1.0％。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中菌體的發(fā)酵魔芋粉加入量是0.7％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中增殖時(shí)間為10-100h，發(fā)酵時(shí)間為20-50h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中增殖時(shí)間為30-90h，發(fā)酵時(shí)間為25-40h。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中增殖時(shí)間為60h，發(fā)酵時(shí)間為32h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中的發(fā)酵次數(shù)為1次以上。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中的發(fā)酵次數(shù)為3次以上。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的地衣芽胞桿菌菌株的固定化發(fā)酵方法，其特征在于，其中，步驟2)中的發(fā)酵次數(shù)為6次。
11.一種提高地衣芽胞桿菌菌株產(chǎn)β-甘露聚糖酶酶活力的固定化方法，其特征在于，將地衣芽胞桿菌以權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)所述的固定化方法進(jìn)行固定。
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