[發(fā)明專利]一種基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610043793.4
• 申請日: 2016-01-22
• 公開（公告）號: CN105527266A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李花;方雪恩;孔繼烈
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;盛志范

1.一種基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法，其特征在于，以紙芯片為載體，利用熒光能量共振轉(zhuǎn)移的方法檢測重金屬汞離子，根據(jù)Cy3熒光染料標(biāo)記Hg²⁺適配體Cy3-Hg²⁺-aptamer能特異性結(jié)合Hg²⁺形成T-Hg²⁺-T結(jié)構(gòu)的性質(zhì)，以Cy3-Hg²⁺-aptamer作為熒光報告分子，氧化石墨烯作為熒光淬滅劑，直接地檢測Hg²⁺。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法，其特征在于，具體操作步驟如下：

（1）利用紙芯片切割機完成紙芯片的設(shè)計與切割；紙芯片材質(zhì)為玻璃纖維；

（2）用氧化石墨烯處理紙芯片：紙芯片上滴加4.0-5.0μL氧化石墨烯，自然晾干；

（3）向經(jīng)氧化石墨烯處理的紙芯片上滴加Hg²⁺適配體：Cy3-Hg²⁺-aptamer，然后再向此紙芯片上加入事先配制好的汞離子溶液；暗處反應(yīng)10min-30min；

（4）在530-600nm激發(fā)光波長下，用熒光倒置顯微鏡激發(fā)，得到熒光恢復(fù)圖片，用數(shù)碼相機將熒光恢復(fù)圖片記錄下來，此過程在暗處操作。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法，其特征在于，所述紙芯片為圓形，直徑：2.00mm-3.0mm，厚度：0.2mm-0.5mm。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法，其特征在于，用于紙芯片處理的氧化石墨烯濃度為0.5-1.0mg/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法，其特征在于，Hg²⁺適配體：Cy3-Hg²⁺-aptamer濃度為5.0-10.0μM。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于紙芯片的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子的方法，其特征在于，所述汞離子溶液的濃度為0.2-1000μM，由PBS緩沖液配制，調(diào)節(jié)pH為7.2-7.4。