[發明專利]人sDR5-Fc抗體融合蛋白作為腎損傷治療藥物的應用

在審

• 申請號: 201610041751.7
• 申請日: 2016-01-21
• 公開（公告）號: CN105688189A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 馬遠方;王志增;張軍;王耀輝;李小全
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61P13/12;A61P9/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 劉建芳;楊海霞

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及人sDR5（solubledeathreceptor5，sDR5）蛋白的藥用用途，尤其是人sDR5-Fc抗體融合蛋白作為腎缺血再灌損傷急救和治療藥物的應用。

背景技術

缺血再灌注損傷是指器官或組織的供血中斷或減少，造成局部組織或器官缺血缺氧，再灌注后不僅不能使組織器官的功能得以恢復，反而使其缺血缺氧所致的功能和代謝障礙及機構破壞進一步加重的現象。臨床上缺血再灌注損傷常見于器官移植、器官部分摘除、創傷及休克等，腎臟由于其血流高灌注的特性，缺血再灌注損傷發生率較高。

瞬間的缺血能夠造成腎臟發生可逆性的損傷，而長期的缺血再灌注可以造成腎臟近曲小管遠端發生不可逆的損傷。腎臟缺血再灌注損傷是臨床上常見的急性腎損傷（acutekidneyinjury，AKI），是導致急性腎衰竭和移植腎功能喪失的主要原因之一，AKI在普通人群中的發病率約為0.5-1%，在住院患者中其發病率為5%，而在一些手術后及重癥加強護理病房患者中其發病率為30-50%；除了較高的發病率，AKI患者還會有很高的死亡率，約為28-90%，約為相同病情未發生AKI患者死亡率的5倍，且存活的患者亦多有不同程度的慢性腎功能不全，特別是在腎臟移植中，腎臟缺血再灌注損傷是影響移植腎臟早起存活的重要因素，可導致移植腎臟短期和長期功能損害，包括移植腎臟原發性無功能、移植腎急性排斥反應、慢性移植腎失功等。對此，目前尚無特殊有效的治療手段，嚴重的病例需終身腎臟替代治療。因此，如何避免腎臟發生缺血再灌注損傷，具有重要的臨床意義。

細胞對缺血缺氧、炎癥介質等損害因素的應答本質上是一種應激反應，細胞應該是細胞功能受損甚至死亡的重要原因之一。在腎臟缺血再灌注損傷中，腎小管上皮細胞存在三種結局：細胞可逆性損傷、細胞壞死和細胞凋亡。隨著急性腎衰竭診斷和治療水平的提高，腎臟缺血與再灌注的間隔時間較以往明顯縮短，腎小管上皮細胞壞死在很大程度減輕，因此在目前多數情況下，腎小管上皮細胞凋亡在腎臟缺血再灌注損傷中占主導作用。

死亡受體5（Deathreceptor，DR5）與腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（TNF－relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL）結合所激活的死亡受體通路，可通過招募相關蛋白形成DISC（death-inducingsignalingcomplex），進而級聯式活化Caspase-8、3等，引起細胞凋亡。全長的DR5是含有411個氨基酸的Ⅰ型跨膜糖蛋白。可溶性死亡受體5（solubleDR5，sDR5）因缺乏跨膜區域不能在細胞膜上表達而被分泌至細胞外。sDR5在正常人外周血中表達較低，因其具有與TRAIL配體相結合的胞外段完整結構，可與細胞膜上的死亡受體競爭性結合TRAIL分子，從而阻斷TRAIL誘導的細胞凋亡。

有研究表明：sDR5可通過阻斷TRAIL誘導的細胞凋亡來減輕乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的肝細胞損傷（參見：Yu-GangLiu,Su-XiaLiu,Xiao-HongLiangetal.BlockadeofTRAILpathwayamelioratesHBV-inducedhepatocyteapoptosisinanacutehepatitismodel.BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications352(2007)329–334）及改善因缺血造成的中樞系統損傷（參見：MinCui,LimeiWang,XiaohongLiangetal.BlockingTRAIL-DR5signalingwithsolubleDR5reducesdelayedneuronaldamageaftertransientglobalcerebralischemia.NeurobiologyofDisease39(2010)138–147）。目前，sDR5對于同樣因缺血引起的腎組織損傷是否存在治療作用，國內外尚無報道。

腎缺血及血運重建后再灌注損傷的發生與腎小管上皮細胞的過度凋亡密切相關，針對凋亡發生的信號轉導通路，利用sDR5-Fc與膜型DR5競爭結合TRAIL，使TRAIL不能啟動凋亡程序的發生，這樣可減少腎組織損傷，改善患者長期預后。

發明內容

本發明目的在于研究人sDR5-Fc抗體融合蛋白通過阻斷/封閉TRAIL-死亡受體通路來減少腎小管上皮細胞凋亡的作用，并進一步提供人sDR5-Fc融合蛋白作為腎損傷治療藥物的應用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：