[發明專利]一種工業化高產快速生產黃桿菌的方法

在審

• 申請號: 201610038230.6
• 申請日: 2016-01-20
• 公開（公告）號: CN105462904A
• 公開（公告）日: 2016-04-06
• 發明（設計）人: 呂敦輝;姚慶彪;朱壯朝
• 申請（專利權）人: 重慶富農現代生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/20
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 王貴君

1.一種工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)菌種培養：將黃桿菌(Flavobacteriummizutaii)菌株接種至含糖量2～6％的培養液中，然后在溫度為28～37℃條件下培養至細胞數為20～60億/ml，得種子培養液；

(2)發酵罐種子培養：將步驟(1)所得種子培養液接種至培養液含糖量為2～6％的發酵罐中，按通氣量為6～14m³/h通入無菌空氣，在溫度為28～37℃條件下培養至細胞數為40～80億/ml，得發酵罐種子培養液；

(3)將步驟(2)所得發酵罐種子培養液接種至培養液含糖量為4～8％的發酵罐中，先按通氣量為16～28m³/h通入無菌空氣，在溫度為28～37℃條件下發酵6～8小時后，按通氣量為28～50m³/h通入無菌空氣，繼續發酵至細胞數為100-200億/ml，得黃桿菌菌液。

2.根據權利要求1所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：所述步驟(1)為將黃桿菌按8～12％接種量接種至含糖量3～6％的培養液中，然后在溫度為30～35℃、pH為7-7.5條件下培養至細胞數為20～80億/ml，得種子培養液。

3.根據權利要求1所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述種子培養液按體積比為1:40接種至種子發酵罐中。

4.根據權利要求1所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：所述pH為7.0。

5.根據權利要求1所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：所述培養液含有氮源、磷源、硫酸鎂和碳酸鈣，各組分質量百分比如下：氮源5-8％，磷源0.1-0.2％，硫酸鎂0.1-0.2％，碳酸鈣0.1-0.5％。

6.根據權利要求5所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：所述氮源為牛肉湯，蛋白胨，玉米汁，硫酸銨，碳酸氫銨，氨水，尿素，硝酸鉀，硝酸鈉，硝酸銨，磷酸銨，磷酸氫銨或磷酸氫二銨中的一種或幾種；所述磷源為磷酸，磷酸銨，磷酸氫銨，磷酸氫二銨，磷酸二氫鉀，磷酸氫二鉀中的一種或幾種。

7.根據權利要求6所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：所述牛肉湯的制備方法如下：將牛肉用蒸汽水煮沸30min，然后過濾得牛肉湯；所述玉米液由以下方法制備：將玉米漿干粉用蒸汽水煮沸，過濾得玉米漿液。

8.根據權利要求5所述工業化高產快速生產黃桿菌的方法，其特征在于：所述培養液的加入方式為氮源，碳源，磷源，硫酸鎂，碳酸鈣隨種子發酵罐培養液加入。