[發明專利]一種利用菊粉進行雙歧桿菌培養的方法

在審

• 申請號: 201610029851.8
• 申請日: 2016-01-18
• 公開（公告）號: CN105483059A
• 公開（公告）日: 2016-04-13
• 發明（設計）人: 王軍
• 申請（專利權）人: 王軍
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及雙歧桿菌培養領域，尤其涉及一種利用菊粉進行雙歧桿菌培養的方 法。

背景技術

雙歧桿菌具有抗腫瘤、抗衰老、降血壓等多重功效，尤其是對腸胃病效果神奇，它 能有效阻斷胃腸病源，快速殺滅致病菌，并增強胃腸功能，提高胃腸免疫力。此后100多年， 雙歧桿菌得到廣泛運用，但雙歧桿菌含量低、活性差、難保存。

發明內容

根據以上技術問題，本發明提供一種利用菊粉進行雙歧桿菌培養的方法，其具體 操作步驟為：

（1）首先進行原種液體培養，將雙歧桿菌菌種放入厭氧培養器皿中進行培養，所述培養 基內需要放置經殺菌處理的培養基，所述培養基由植物蛋白胨、胰胨、酵母浸膏、葡萄糖、鹽 溶液、蒸餾水構成，培養時培養器皿放置在通風處，確保培養器皿處理低溫狀態；

（2）然后進行多級菌種培養，所述多級培養分為一級靜態培養、動態培養、二級靜態培 養，所述一級靜態培養時將土豆、菊粉進行蒸煮，蒸煮后將其攪拌并混合在一起，然后將其 放入作為培養基放入培養液中備用，再將上述步驟中的菌種接種到培養液中；動態培養時 取一級靜態培養液，但培養皿換為無色透明試劑瓶，將試劑瓶進行滅菌，滅菌后放入培養 液，然后接種一級菌種10%后，每隔5小時晃動1分鐘，培養24-96小時，當細胞達到1.0億CFU/ g時終止培養，室溫下保存備用；動態培養后進行二級靜態培養，取植物蛋白胨、肝提取液、 玉米漿、酵母膏、肉牛浸膏、西紅柿培養基放入蒸餾水中進行溶解，溶解后將菊粉進行蒸煮， 蒸煮后將菊粉和上述溶解液進行混合，以此作為培養基，然后進行二級菌種接種，接種20% 后靜置，當細胞達到1.8億CFU/g時終止培養，室溫下保存備用；

（3）最后進行固體培養，利用玉米粉、大米粉、菊粉、全脂乳粉、肝提取液、玉米漿、酵母 膏、肉牛浸膏進行固體培養基制作，然后對培養基進行冷卻滅菌，然后將三級液態菌種浸入 到固體培養內，然后將浸入菌種的固體培養基放入培養房內進行靜置發酵培養，當細胞達 到6億CFU/g時終止培養。

所述西紅柿浸出液的制備方法為：將新鮮西紅柿洗凈稱重后切碎，加等量蒸餾水 在100℃水浴中加熱，時時攪拌，約90min，然后用絨布過濾，校正pH7.0，分裝三角瓶，115 ℃高壓滅菌15～20min。

所述肝提取液的制備方法為：稱取新鮮豬肝1000g，切成小塊或絞碎，加蒸餾水至 2000mL，混勻，置冰箱中過夜，第二天煮沸15～20min，絨布過濾，并擠壓收集全部濾液,加水 補足原量，分裝三角瓶，115℃高壓滅菌15～20min。

所述菊粉的制備方法為：首先將菊芋清洗粉碎，加入菊芋質量的1-2倍質量體積的 水混勻后用泵打入浸提罐；然后添加纖維素酶和果膠酶進行浸提：往浸提罐里加入纖維素 酶和果膠酶，得菊粉浸提液；酶加量為酶活與菊芋質量比，其中纖維素酶的加量為0.01~ 0.5U/g，果膠酶的加量為10~100U/g，浸提溫度50℃，浸提時間為20min~60min；再進行 菊粉浸提液除雜脫色：菊粉浸提液中加入石灰乳調節pH至11-13，80℃靜置30min，再用磷酸 調節至pH6，過濾，濾液中加入其質量0.5%~2%的活性炭，80℃攪拌20~30min，得除雜脫 色的浸提液；最后進行濃縮噴霧干燥：除雜脫色的浸提液通過減壓蒸餾或膜濃縮方式濃縮， 得菊粉濃度20%~30%的菊粉濃縮液；對菊粉濃縮液進行噴霧干燥，得到菊粉粉末成品。

本發明的有益效果為：現代人生活節奏加快，工作壓力增大，由此而引發的各種腸 胃疾病尤其普遍，高活性的長型雙歧桿菌更能直接補充有益菌，調整人體微生態平衡。本發 明改變了傳統的培養基，利用菊粉進行培養，菊粉中含有大量的菊糖，菊糖可以預防便秘及 治療肥胖癥膳食纖維減少食物在胃腸的停留時間，以及增加糞便量，有效地治療便秘。菊糖 可以提高內容物的黏度，降低食物從胃進入小腸的速度，從而降低饑餓感，減少食物的攝食 量，起到減肥作用，本發明利用菊粉對雙歧桿菌進行培養，雙歧桿菌在培養過程中將菊糖進 行吸收可以有效的提高雙歧桿菌的活性和吸收效果，促進雙歧桿菌在人體腸內發酵后可產 生乳酸和醋酸，能提高鈣、磷、鐵的利用率，促進鐵和維生素D的吸收。

具體實施方式

根據實施例所示，對本發明進行進一步說明：

實施例1