[發(fā)明專利]一種高抗氧化性蛋白肽及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610029497.9
• 申請日: 2016-01-14
• 公開（公告）號: CN105567772B
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張立彥
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州市仟壹生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;A23L33/18
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 羅觀祥

1.一種高抗氧化性蛋白肽的制備方法，其特征在于包含如下步驟：

（1）預(yù)處理

將破碎過篩后的蟹加工下腳料與異丙醇混合均勻后回流加熱脫脂，清洗并干燥脫脂后的蟹加工下腳料，得到蟹粉；

（2）蛋白酶水解處理

取步驟（1）制得的蟹粉與水混勻后加熱至50～62℃，調(diào)整反應(yīng)體系pH值為8.2～9.0，然后加入堿性蛋白酶，50～62℃酶解1.5～2.5 h；酶解結(jié)束后將反應(yīng)體系加熱到85～100℃，保溫10～15 min，使堿性蛋白酶失活；將反應(yīng)體系冷卻到45～60℃，并調(diào)整反應(yīng)體系pH值為6.5～7.5，然后加入中性蛋白酶，45～60℃酶解1.5～2.5 h；酶解結(jié)束后將反應(yīng)體系加熱到85～100℃，保溫10～15 min，使酶失活；然后離心分離，得到上清液；

（3）超濾

將步驟（2）制得的上清液加熱到40～50℃，然后超濾分離，分離得到分子量小于10kDa的多肽溶液；

（4）凝膠色譜過濾

將步驟（3）超濾得到的多肽溶液過凝膠色譜Sephadex G-25M柱，收集得到分子量為1000～5000的多肽分子的溶液；

（5）濃縮及干燥

將步驟（4）收集的溶液經(jīng)濃縮，然后干燥，得到干態(tài)多肽物質(zhì)，即為高抗氧化性蛋白肽；

步驟（1）中所述的蟹加工下腳料與異丙醇的質(zhì)量比為10：（10～30）；

步驟（1）中所述的回流加熱的條件為：溫度為50～75℃，時間為20～35 min。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高抗氧化性蛋白肽的制備方法，其特征在于：

步驟（2）中所述的堿性蛋白酶的用量為2800～3500 U/g蟹粉。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高抗氧化性蛋白肽的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述的中性蛋白酶的用量為2000～2500 U/g蟹粉。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高抗氧化性蛋白肽的制備方法，其特征在于：

步驟（3）中所述的超濾的操作壓力為0.10～0.18 MPa。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高抗氧化性蛋白肽的制備方法，其特征在于：

步驟（4）中過凝膠色譜Sephadex G-25M柱的洗脫劑為水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高抗氧化性蛋白肽的制備方法，其特征在于：

步驟（5）中所述的濃縮為真空濃縮，真空濃縮的條件為：50～60℃，真空度0.080～0.090 Mpa。

7.一種高抗氧化性蛋白肽，其特征在于：通過權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到。

8.權(quán)利要求7所述的高抗氧化性蛋白肽在食品和保健品加工領(lǐng)域中的應(yīng)用。