[發明專利]滾筒式收集制備三維貫通類血管結構網絡支架的方法

有效

• 申請號: 201610026442.2
• 申請日: 2016-01-16
• 公開（公告）號: CN105664262B
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發明（設計）人: 胡慶夕;李帥;劉媛媛;孫元劭;李瑜;劉嫦娥
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: A61L27/52
• 分類號: A61L27/52;A61L27/38;A61L27/22;B33Y30/00;B33Y10/00
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 何文欣

1.滾筒式收集制備三維貫通類血管結構網絡支架的方法，其特征在于：采用的三維實體網絡制備系統由齒輪(1-2)和滾輪(1-3)提供所需材料推動力；采用加熱模塊(1-4)和擠出噴頭(1-5)作為供料模塊；采用含有不同結構的圓柱形滾筒作為收集裝置；利用絲材PVA的水溶性特點，待其成型完畢后將其犧牲掉；制備工藝流程如下：

1)材料和原液制備：三維實體網絡材料選用無毒的水溶性絲材；水凝膠通過熱水浴的方法將其溶解；

2)材料擠出：材料擠出，將加熱噴頭加熱到設定溫度，將推送到加熱模塊的絲材進行溶解，并由擠出噴頭(1-5)處擠出；

3)三維實體網絡結構制備：采用具有圓柱形滾筒進行接收，接收滾筒具有三個自由度，軸向的雙向移動和旋轉，以便在其上接收到不同結構的三維實體網絡結構；擠出噴頭(1-5)處擠出的絲材沉積到圓柱形滾筒上，形成了本身就具有三維結構的實體網絡；

4)三維貫通類血管結構網絡的制備：將沉積后的三維實體結構(4-1)靜置在具有設定濃度的水凝膠(4-2)中；室溫靜置后，待其凝膠化后取出；對其進行適當的修剪，露出三維實體結構的頭部和尾部，以便對其進行處理；然后將其放入液體中進行溶解；三維實體結構溶解完畢后，即可獲得三維貫通結構網絡的水凝膠支架；

5)組織工程支架細胞培養：將制備好的含有三維貫通結構網絡的水凝膠支架放入含有細胞的培養液中進行動態培養。

2.根據權利要求1所述的滾筒式收集制備三維貫通類血管結構網絡支架的方法，其特征在于：所述步驟1)材料和原液制備：三維實體網絡材料選用無毒的水溶性絲材聚乙烯醇PVA；水凝膠采用明膠gelatin，通過熱水浴的方法將其溶解，由于此特點，若將此支架移植到體內支架會溶解，因此為了提高此款支架的穩定性，特在水凝膠中加入提高其凝膠特性的谷氨酰胺轉氨酶TG，提高其凝膠化程度，避免成型后溶解現象；其配制方法為先配制質量比為9.5％～10.5％明膠溶液，在60±2℃的熱水浴中對其進行溶解，待其呈透明狀時加入谷氨酰胺轉氨酶粉末，攪拌均勻后即可使用，此款水凝膠中明膠和谷氨酰胺轉氨酶之比為10:1～10：1.1。

3.根據權利要求1所述的滾筒式收集制備三維貫通類血管結構網絡支架的方法，其特征在于：所述步驟2)材料擠出：材料擠出，將加熱噴頭加熱到210±10℃，將推送到此模塊的PVA絲材進行溶解，并由擠出噴頭處擠出。

4.根據權利要求1所述的滾筒式收集制備三維貫通類血管結構網絡支架的方法，其特征在于：所述步驟4)三維貫通類血管結構網絡的制備：將沉積后的三維實體結構(4-1)靜置在具有設定濃度的明膠(4-2)中；室溫靜置15±0.5min后，將其放入到4±0.2℃的環境中30±1min誘導酶促進明膠進行共價交聯，然后將其放入到37±1℃的環境中6±0.2h，此時的酶活性最高，促進明膠的凝膠化，待其凝膠化后取出；對其進行適當的修剪，露出三維實體結構的頭部和尾部，以便對其進行處理；然后將其放入磷酸鹽緩沖液PBS中進行溶解；三維實體結構溶解完畢后，即可獲得三維貫通結構網絡的水凝膠支架。