[發明專利]一種融合蛋白在化妝品中的應用

有效

• 申請號: 201610026298.2
• 申請日: 2016-01-16
• 公開（公告）號: CN105504066A
• 公開（公告）日: 2016-04-20
• 發明（設計）人: 陳松彬;倪彥艷;張愛萍;吳純玲
• 申請（專利權）人: 廣州市科瑋生物技術有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K14/475;C12N15/70;A61K8/64;A61Q19/08;A61Q19/02;A61Q19/00
• 代理公司: 廣州市深研專利事務所 44229
• 代理人: 陳雅平

技術領域

本發明涉及一種融合蛋白在化妝品中的應用，屬于日化產品領域。

背景技術

干細胞是人體的起源細胞，是一類具有多向分化潛能和自我復制能力的原始的未 分化細胞，是形成哺乳類動物的各組織器官的原始細胞，有“萬能細胞”之美譽。人類衰老的 根本原因在于干細胞本身的衰老，干細胞生成新細胞的活力會隨著年齡的增長而逐漸降 低，因此肌膚就會漸漸失去彈性、老化、暗淡等衰老現象。hSCGF可以快速激活休眠的皮膚干 細胞并促使其生長，讓皮膚干細胞達到活化、修復、再生的能力，調節體內微環境，為皮膚干 細胞提供有力的生長環境。但hSCGF作為一種生物活性蛋白，在涂抹情況下很難被皮膚吸 收，限制了其在化妝品領域的應用。

隨著現代透皮技術的發展，增強透皮效果成為可能，現常用的促透技術可以分為 兩大類，一類為化學促透技術，另一類為物理促透技術?；瘜W促透技術主要是通過在透皮制 劑中加入化學成分，改變皮膚角質層結構，溶解皮脂或打開毛孔、毛囊，促進藥物在皮膚中 的擴散與溶解，促進皮膚各部位的血液流暢等手段來提高藥物吸收效率。物理促透技術主 要是通過一些物理手段來破壞皮膚表層結構，使一些親水性的大分子如蛋白藥物直接到達 皮膚內部發揮治療效果，但是其對設備要求高，應用并不廣泛。

透皮增強肽是一種能夠促進蛋白質透皮的短肽，現已發現的有TD1，其氨基酸序列 為：ACSSSPSKHCG；SPACE,其氨基酸序列為：ACHSALTKHCG；T2，其氨基酸序列為：LVGVFH。但現 有技術中未有透皮增強肽用于化妝品的報道。

發明內容

為克服現有技術的缺點和不足，本發明提供了一種融合蛋白及其在化妝品中的應 用方法，該融合蛋白包括一種透皮肽和人干細胞生長因子hSCGF，透皮肽通過連接肽或共價 連接到hSCGF的N端或C端。本發明發現透皮肽可以促進干細胞生長因子透皮肽穿過完整皮 膚，從而提高干細胞生長因子的肌膚吸收率。

為了實現上述目的，本發明采用了如下的技術方案：

一種融合蛋白，其結構為A-B-X,或A-A-B-X,或A-B-X-B-A；所述A為一種透皮肽，選自 TD1、SPACE或T2；所述B為共價鍵或長度為2-25個氨基酸的連接肽；X為人干細胞生長因子 hSCGF。

所述A優選為TD1。

所述人干細胞生長因子優選根據人hSCGF全長基因序列（GenBankAccession NO.BC005810.2）克隆得到。

優選的，所述A共價連接到hSCGF的N端。

優選的所述A為TD1，且A共價連接到hSCGF的N端。

優選的，所述融合蛋白通過Ni₂⁺的ChelatingSegparoseFastFlow純化得到。

更具體的，所述融合蛋白通過如下方法制備得到：從健康的新生兒或小兒包皮環 切術切除的包皮組織中提取總RNA，根據人SCGF全長基因序列（GenBankAccession NO.BC005810.2）設計PCR引物F1，F2；F1：GAGTCCAGCTTAATGC，F2：AAGACACTAACAAGGAGGAG， RT-PCR擴增SCGFcDNA，共價連接將TD1（透皮肽）連接至hSCGF的N端，得到了TD1-hSCGF融合 基因；將其克隆入原核表達質粒pET-22b（+），構建表達載體pET-22b-TD1-hSCGF，將表達質 粒轉化E.coliRosetta（DE3），TD1-hSCGF融合蛋白通過Ni₂⁺的ChelatingSegparoseFast Flow純化，獲得純化的融合蛋白。

上述融合蛋白在化妝品中的應用，其特征是：通過化妝品生產工藝將上述融合蛋 白添加到化妝品中，其中，每100g化妝品的TD1-hSCGF添加量為1μg~30μg，純度大于90%。

本發明的融合蛋白在化妝品中的應用，其特征是：所述的化妝品包括護膚、健膚、 功效性的美容化妝品。

本發明的融合蛋白在化妝品中的應用，其特征是：所述的化妝品包括護膚、健膚、 功效性的美容產品包括柔膚水、乳液、活性原液、抗衰眼霜、活力面膜、潤膚霜、凍干粉。

一種含一種或幾種本發明融合蛋白的活性原液，按質量百分比計，包括以下組分：

卡波9400.1-0.5%

尿囊素0.05-1.0%