[發(fā)明專利]肝臟誘癌劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610024291.7
• 申請日: 2016-01-14
• 公開（公告）號: CN105534963B
• 公開（公告）日: 2018-04-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李玉桑;顧洪偉;唐和斌;張煒;陳夕楨
• 申請（專利權(quán)）人: 中南民族大學(xué)
• 主分類號: A61K31/131
• 分類號: A61K31/131;A61K9/08;A61K47/44;G09B23/28
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所42001
• 代理人: 余曉雪,王敏鋒

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種肝臟誘癌劑、肝臟誘癌劑的制備方法以及基于肝臟誘癌劑建立原發(fā)性肝癌模型的方法。

背景技術(shù)

原發(fā)性肝癌是最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，在我國其發(fā)病率和死亡率均為世界首位，是嚴(yán)重危害健康的重大疾病(The management of hepatocellular carcinoma in Asia：A guideline combining quantitative and qualitative evaluation.BiosciTrends，2010，6：283-287)。遺憾的是其發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明。因此，深入研究肝癌的發(fā)病機(jī)制，尋找防治肝癌的有效手段，可更好地服務(wù)于人類健康(A decade’s studies on metastasis of hepatocellular carcinoma.J Cancer Res Clin Oncol，2004，130：187-196)。

要研究肝癌的發(fā)生機(jī)制，首先要建立與人類肝癌自然發(fā)生過程相似的動(dòng)物模型。常見的肝癌動(dòng)物模型有：自發(fā)性肝癌模型、移植型肝癌模型、轉(zhuǎn)基因肝癌模型以及化學(xué)誘發(fā)性肝癌模型。自發(fā)性肝癌由于發(fā)生情況不均，很難在短時(shí)間內(nèi)獲得大量類似的腫瘤學(xué)材料，且觀察時(shí)間長，實(shí)驗(yàn)耗費(fèi)較大，故在實(shí)際科研工作中較少使用。移植性肝癌模型操作繁雜，成功率依賴于技術(shù)的成熟性，因此較難獲得；轉(zhuǎn)基因動(dòng)物肝癌模型制作技術(shù)要求極高，價(jià)格昂貴，國內(nèi)開展的尚較少；化學(xué)誘發(fā)性肝癌模型操作簡便，成本低，且能較好的模擬人類肝癌的自然病理過程，制作方法簡單，是最常用的建模方法之一(肝癌動(dòng)物模型的研究進(jìn)展。世界華人消化雜志，2011，19：1275-1278)。化學(xué)誘發(fā)型肝癌模型最經(jīng)典方法的是將二乙基亞硝胺(DEN)溶于水中，給予小鼠自由飲用(Chemoprevention by Lipid-soluble Tea Polyphenols in Diethylnitrosamine/Phenobarbital-induced Hepatic Pre-cancer Lesion.Anticancer Res，2014，34：683-693)，這樣的缺陷在于給藥劑量很難控制，小鼠順應(yīng)性差，個(gè)體差異大，死亡率高。

隨著納米技術(shù)的快速發(fā)展，納米材料因其具有靶向定位、緩釋控釋藥物、載藥量高、提高藥物吸收率等優(yōu)點(diǎn)而在藥物傳輸、癌癥治療、基因治療等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用(Codelivery of doxorubicin and curcumin with lipid nanoparticles results in improved efficacy of chemotherapy in liver cancer.International Journal of Nanomedicine，2015，10：257-270)，但是利用其負(fù)面生物效應(yīng)，在疾病造模領(lǐng)域的應(yīng)用尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決背景技術(shù)中所存在的技術(shù)問題，本發(fā)明進(jìn)而提供了一種穩(wěn)定性強(qiáng)、耗時(shí)短以及致死率低的肝臟誘癌劑、肝臟誘癌劑的制備方法以及基于肝臟誘癌劑建立原發(fā)性肝癌模型的方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種肝臟誘癌劑，其特征在于：所述肝臟誘癌劑是二乙基亞硝胺(DEN)非水溶液。

作為優(yōu)選，本發(fā)明所提供的肝臟誘癌劑是DEN油溶液。

作為優(yōu)選，本發(fā)明所提供的肝臟誘癌劑是DEN麻油溶液。

作為優(yōu)選，本發(fā)明所提供的肝臟誘癌劑是納米化的DEN油溶液。

作為優(yōu)選，本發(fā)明所提供的納米化的DEN油溶液中的DEN的含量不低于20.625mg·ml^-1。

作為優(yōu)選，本發(fā)明所提供的納米化的DEN油溶液中的DEN的含量是20.625mg·ml^-1-41.25mg/ml^-1。

一種用于制備如上所述的肝臟誘癌劑的方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

1)將DEN以及蛋黃卵磷脂溶于麻油中，制備得到油相；所述DEN的終濃度是10.97％V/V-21.94％V/V；所述蛋黃卵磷脂的終濃度是6％W/V；

2)將Tween 80以及甘油溶于超純水中，制備得到水相；所述Tween 80的終濃度是1.25％V/V；所述甘油的終濃度是2.81％V/V；