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[發(fā)明專利]一種用于核酸純化的納米磁珠在審

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201610023432.3 申請日: 2016-01-14
公開(公告)號: CN105561914A 公開(公告)日: 2016-05-11
發(fā)明(設(shè)計)人: 王海濱;王棽;周其玲;馮小霞 申請(專利權(quán))人: 北京納捷診斷試劑有限公司
主分類號: B01J20/10 分類號: B01J20/10;B01J20/28;C12N15/10;H01F1/42
代理公司: 北京市躍揚知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11559 代理人: 葉平
地址: 101111 北京市大興區(qū)北京*** 國省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 用于 核酸 純化 納米
【權(quán)利要求書】:

1.一種用于核酸純化的納米磁珠,其特征在于,所述納米磁珠由以下步驟制備而成:

步驟A)納米微球的制備:

在氬氣保護下,在含有13~17g硫酸亞鐵七水合物和8~12g三氯化鐵六水合物的水溶 液中,每間隔10分鐘滴加1ml0.4M~0.6M氫氧化鈉溶液;當反應(yīng)溶液變?yōu)槟z狀乳濁液時,每 間隔20分鐘滴加1ml0.2M~0.3M氫氧化鈉溶液,搖床持續(xù)搖勻,搖床速度100轉(zhuǎn)/分鐘,待出 現(xiàn)磁性后,繼續(xù)在氬氣保護下反應(yīng)4~10小時;隨后在所得溶液中加入氯化鈉,使氯化鈉終 濃度為0.5M~1M;室溫靜置18~36小時后使用去離子水漂洗至溶液pH為7;再使用0.2M~ 0.3M的氫氧化鈉溶液配成磁珠體積百分比為20%~40%的磁珠懸液,即得;

步驟B)通過表面修飾制備納米磁珠:

將步驟A)所得磁珠懸液在50℃~60℃條件下通入氬氣并均勻攪拌;加入60g九水硅酸 鈉攪拌至完全溶解,每3min滴加0.5ml冰乙酸,搖床持續(xù)搖勻,搖床速度100轉(zhuǎn)/分鐘,攪拌 2h;當pH值為6~8時,使用3倍于所述磁珠懸液體積的0.3M氯化鈉溶液漂洗5次,再使用0.3M 氯化鈉溶液配制成磁珠體積百分比為20%~40%的磁珠懸液;在得到的磁珠懸液中加入 30gPEG-1750,搖床持續(xù)搖勻,搖床速度100轉(zhuǎn)/分鐘,攪拌24h;使用3倍于所述磁珠懸液體 積的0.3M的氯化鈉溶液漂洗5次;再使用0.3M氯化鈉溶液和疊氮鈉配制成磁珠體積百分比 為40%~60%的磁珠懸液,即得所述納米磁珠。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于核酸純化的納米磁珠,其特征在于,步驟A)所述含有硫酸 亞鐵七水合物和三氯化鐵六水合物的水溶液的溶劑為脫氧去離子水。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于核酸純化的納米磁珠,其特征在于,步驟A)所述含有硫酸 亞鐵七水合物和三氯化鐵六水合物的水溶液中硫酸亞鐵七水合物的質(zhì)量為15g,三氯化鐵 六水合物的質(zhì)量為10g。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于核酸純化的納米磁珠,其特征在于,步驟A)所述使用0.2M ~0.3M氫氧化鈉溶液配成的磁珠懸液中磁珠體積百分比為30%。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于核酸純化的納米磁珠,其特征在于,步驟B)所述通入氬氣 并均勻攪拌是在55℃條件下進行的。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于核酸純化的納米磁珠,其特征在于,步驟B)中再使用0.3M NaCl和疊氮鈉配制成磁珠體積百分比為50%的磁珠懸液。

7.一種核酸純化試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包含權(quán)利要求1~10中任意一項所述 的納米磁珠。

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