[發明專利]一種用于評估子宮內膜容受性的試劑盒及其使用方法

在審

• 申請號: 201610023286.4
• 申請日: 2016-01-13
• 公開（公告）號: CN105628913A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發明（設計）人: 刁梁輝;黃春宇;李玉葉;陳現;張濤;林升來
• 申請（專利權）人: 深圳中山生殖與遺傳研究所
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊倫

技術領域

本發明涉及一種用于評估子宮內膜容受性的試劑盒及其使用方法，屬于 醫學和生物學檢測領域。

背景技術

據世界衛生組織評估，目前每7對夫婦中約有1對夫婦存在生殖障礙問 題，主要表現為流產或不孕。關注生殖健康是國家發展的重要部分。研究表 明，子宮內膜容受性的改變可能是導致生殖障礙的主要因素之一。子宮內膜 容受性是指子宮內膜接受胚胎的能力，指子宮內膜處于一種允許胚胎定位、 黏附和侵入的狀態。該時期又被稱為子宮內膜的種植窗期。如果種植窗期子 宮內膜對胚胎的容受性發生異常，其對胚胎發生排斥反應，進而不允許胚胎 正常著床發育，這一狀態將會導致流產或不孕等不良妊娠結局。因此，子宮 內膜容受性的評估對于生殖障礙患者的診治具有重要意義。

目前，臨床中子宮內膜容受性的評估手段主要是形態學評估。其評估指 標包括三大類：(1)子宮內膜厚度、回聲和血流等超聲形態；(2)腺體大 小、間質疏密和血管豐度等組織活檢形態；(3)子宮內膜胞飲突。然而， 形態學評估子宮內膜容受性存在一定爭議。因為，子宮內膜容受性由一系列 細胞和細胞因子相互作用調控，細胞及其分泌的細胞因子在與胚胎接觸過程 中發揮重要作用。但是，子宮內膜的形態學表征并不能準確反映其細胞和細 胞因子的表達情況。

在此背景下，子宮內膜活檢結合分子檢測等新的評估手段開始發展。因 此，子宮內膜容受性生物標記物的研究越來越受到重視。研究表明，子宮內 膜免疫細胞在其容受性調控中發揮重要作用。子宮內膜免疫細胞主要包括自 然殺傷細胞、巨噬細胞、T細胞和樹突狀細胞等四大類。并且，各類免疫細 胞又分為不同的亞群，在子宮內膜容受性調節中發揮不同的作用。自然殺傷 細胞作為子宮內膜中主要的免疫細胞，通過促進滋養層細胞侵入、支持螺旋 動脈重構以及調控自身殺傷能力等途徑調節子宮內膜容受性，參與胚胎種 植。巨噬細胞在子宮內膜局部及系統激素的調節下可以進行亞群的轉換，在 種植過程中既可以清除病原體，又可以誘導子宮內膜對胚胎的免疫耐受，進 而維持成功妊娠。T細胞主要包括輔助性T細胞、殺傷性T細胞以及調節性 T細胞。其中，輔助性T細胞主要通過分泌細胞因子，調控子宮內膜的分化， 為胚胎種植做好準備；殺傷性T細胞主要通過調控滋養層細胞侵入與分泌毒 性顆粒的平衡參與種植過程；而調節性T細胞發揮免疫抑制作用，其通過抑 制子宮內膜對胚胎的過度炎癥反應，進而維持繼續妊娠。樹突狀細胞作為重 要的抗原提呈細胞，根據其成熟程度可以分為兩類：未成熟樹突狀細胞和成 熟樹突狀細胞。未成熟樹突狀細胞在妊娠中發揮免疫耐受作用，而成熟樹突 狀細胞在妊娠中發揮免疫排斥作用，因此，兩者的平衡在子宮內膜接受胚胎 過程中同樣發揮著必不可少的作用。以上研究結果表明，子宮內膜容受性的 調控因素并不是單一的，而是各種免疫細胞相互作用，相互平衡的結果。

但是，目前國內外以子宮內膜免疫細胞作為其容受性評估指標時，多是 檢測其中一種免疫細胞，并且檢測方法各異，分析結果不統一、波動性大。 根據這些結果，臨床醫生不能對患者子宮內膜容受性進行準確評估，故而無 法制定完善的治療方案。因此，開發穩定可靠的子宮內膜多種免疫細胞檢測 試劑盒可以對子宮內膜容受性進行準確評估，為患者的診療提供可靠依據。

目前針對子宮內膜免疫細胞數量的檢測方法主要有流式細胞術和免疫 組織化學檢測兩種方法。但是，流式細胞術不能對子宮內膜細胞的定位情況 進行分析，并且在制備細胞懸液的過程中存在細胞和抗原丟失等問題。因此， 免疫組織化學染色方法成為了更好的選擇。在臨床上，免疫組織化學染色已 經在腫瘤病理診斷中得到了廣泛應用，涉及領域包括腫瘤組織起源的鑒別、 未分化惡性腫瘤性質的判定、各種形態系統腫瘤鑒別、確定腫瘤原發部位等。 其原理是用標記的抗體對細胞或組織內的相應抗原進行定位、定性或定量檢 測，經過組織化學的呈色反應而呈現醒目的陽性色彩，在光學顯微鏡、熒光 顯微鏡或電子顯微鏡下進行人工計數，或者采用顯微鏡采集圖像并結合病理 圖片分析軟件對其進行定量分析。

發明內容

本發明的目的之一，是提供一種用于子宮內膜容受性評估的試劑盒。本 發明的試劑盒可全面評估生殖障礙患者的子宮內膜容受性，為生殖障礙患者 的病因診斷提供新的檢測指標，為其個體化診療方案的制定提供可靠依據。