[發明專利]共表達抗EGFRvIII嵌合抗原受體和免疫檢查點抑制分子的轉基因淋巴細胞及其用途

有效

• 申請號: 201610022379.5
• 申請日: 2016-01-13
• 公開（公告）號: CN106967685B
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 嚴勇朝;朱益林;陳思毅
• 申請（專利權）人: 北京馬力喏生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N7/01;C12N15/63;A61K35/17;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一種T淋巴細胞，其特征在于，所述T淋巴細胞的細胞免疫檢查點PD1被沉默；以及

表達嵌合抗原受體，其中，

所述嵌合抗原受體包括：

胞外區，所述胞外區包括單鏈抗體的重鏈可變區和輕鏈可變區，所述單鏈抗體特異性識別抗原EGFRvIII；

跨膜區，所述跨膜區與所述胞外區相連，并且嵌入到所述T淋巴細胞的細胞膜中；

胞內區，所述胞內區與所述跨膜區相連，并且所述胞內區包括CD28或4-1BB的胞內段以及CD3ζ鏈，

所述T淋巴細胞是通過將攜帶含有SEQ ID NO：136、138或139所示的核苷酸序列的慢病毒導入受體T淋巴細胞中獲得的。

2.一種慢病毒，其特征在于，所述慢病毒攜帶含有SEQ ID NO：136、138、139任一所示的核苷酸序列。

3.一種轉基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞細胞免疫檢查點PD1被沉默；

以及表達嵌合抗原受體；

其中，所述嵌合抗原受體包括：

胞外區，所述胞外區能夠與抗原特異性結合，所述胞外區包括抗體的重鏈可變區和輕鏈可變區，所述抗體為單鏈抗體，所述抗體結合所述抗原，所述抗原為EGFRvIII；

跨膜區；以及

胞內區，所述胞內區包括免疫共刺激分子胞內段；

所述轉基因淋巴細胞是通過將權利要求2所述的慢病毒導入淋巴細胞后獲得。

4.根據權利要求3所述的轉基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞是CD3+T淋巴細胞。

5.根據權利要求3所述的轉基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞是自然殺傷細胞。

6.根據權利要求3所述的轉基因淋巴細胞，其特征在于，所述淋巴細胞是自然殺傷T細胞。

7.一種構建體，其特征在于，所述構建體包括：

第一核酸分子，所述第一核酸分子編碼嵌合抗原受體；以及

第二核酸分子，所述第二核酸分子沉默細胞免疫檢查點PD1，

其中，所述構建體攜帶含有SEQ ID NO：136、138或139所示的核苷酸序列。

8.根據權利要求7所述的構建體，其特征在于，所述構建體的載體是非致病性病毒載體。

9.根據權利要求8所述的構建體，其特征在于，所述構建體的載體是病毒載體，所述病毒載體包括選自反轉錄病毒載體、慢病毒載體或腺病毒相關病毒載體的至少之一。

10.一種用于治療癌癥的治療組合物，其特征在于，包括：

權利要求7～9任一項所述的構建體、權利要求2所述的慢病毒、權利要求1所述的T淋巴細胞或者權利要求3～6任一項所述的轉基因淋巴細胞。

11.根據權利要求10所述的治療組合物，其特征在于，所述癌癥包括腦膠質母細胞瘤、非小細胞肺癌、乳腺癌或卵巢癌。