[發明專利]一種磁珠法提取核酸的裂解液

有效

• 申請號: 201610022017.6
• 申請日: 2016-01-14
• 公開（公告）號: CN105420230B
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 王海濱;王棽;周其玲;馮小霞
• 申請（專利權）人: 北京納捷診斷試劑有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京市躍揚知識產權代理事務所(普通合伙) 11559
• 代理人: 李鵬

1.一種磁珠法提取核酸的裂解液，其特征在于，所述裂解液由0.2～0.4N氫氧化鈉、0.3～0.6M氯化鉀、0.01～0.05％N-月桂酰肌氨酸鈉、5mM EDTA、0.3～0.6M Tris-HCl 和1～2％曲通X-100組成；

所述裂解液用于磁珠法提取細胞、細菌、血清、血漿、唾液、尿液或胸腹水中的核酸。

2.根據權利要求1所述的裂解液，其特征在于，所述裂解液由0.25～0.35N氫氧化鈉、0.4～0.5M氯化鉀、0.02～0.04％N-月桂酰肌氨酸鈉、5mM EDTA、0.4～0.5M Tris-HCL和1～2％曲通X-100組成。

3.根據權利要求2所述的裂解液，其特征在于，所述裂解液由0.3N氫氧化鈉、0.45M氯化鉀、0.03％N-月桂酰肌氨酸鈉、0.45M Tris-HCL、5mM EDTA和1％曲通X-100組成。

4.根據權利要求1～3任意一項所述的裂解液，其特征在于，所述裂解液還包括3～8mMDTT。

5.根據權利要求1～3任意一項所述的裂解液，其特征在于，所述裂解液還包括不多于0.001wt％的提取指示劑，所述提取指示劑選自溴酚藍、石綠、甲基紅、甲基橙、羅丹名、溴甲酚綠、品紅、二甲酚橙、二苯胺或剛果紅中的一種。

6.根據權利要求5所述的裂解液，其特征在于，所述提取指示劑為溴酚藍。

7.一種磁珠法核酸提取的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權利要求1～3任意一項所述的裂解液和洗滌液。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述洗滌液為0.3～0.6M氯化鉀溶液，所述洗滌液的pH值為4～5。

9.根據權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述洗滌液還包括不多于0.001wt％的洗滌指示劑，所述洗滌指示劑選自溴酚藍、石綠、甲基紅、甲基橙、羅丹名、溴甲酚綠、品紅、二甲酚橙、二苯胺或剛果紅中的一種。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述洗滌指示劑為石綠。

11.根據權利要求1所述的裂解液，其特征在于，所述裂解液用于磁珠法提取血清或血漿中的核酸。

12.根據權利要求1所述的裂解液，其特征在于，所述裂解液用于在PCR檢測中磁珠法提取待測樣品的細胞、細菌、血清、血漿、唾液、尿液或胸腹水中的核酸。

13.一種如權利要求7所述的試劑盒的應用，其特征在于，所述試劑盒用于PCR、酶切、分子雜交、文庫構建或Southern雜交過程中的核酸提取。