[發明專利]一種用于治療腎病及心血管疾病的水蛭小肽有效部位組合物

有效

• 申請號: 201610020151.2
• 申請日: 2016-01-13
• 公開（公告）號: CN105535923A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發明（設計）人: 代龍;凌中鑫;尹雷
• 申請（專利權）人: 安徽生物肽產業研究院有限公司
• 主分類號: A61K38/01
• 分類號: A61K38/01;A61K36/537;A61K35/62;A61P13/12;A61P9/00;A61P9/10
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1.一種用于治療腎病合并心血管病的水蛭小肽有效部位組合物，其特征在于是由從水 蛭中提取的水蛭小肽、從黃芪中提取的黃芪總皂苷、從當歸中提取的當歸總酚酸和從丹參 中提取的丹參總酚酸組成的，其中，各有效部位的重量配比為：

水蛭小肽3～9重量份

黃芪總皂苷2～8重量份

當歸總酚酸3～5重量份

丹參總酚酸2～4重量份。

2.如權利要求1所述的水蛭小肽有效部位組合物，其特征在于各有效部位的重量配比 為：水蛭小肽6重量份、黃芪總皂苷5重量份、當歸總酚酸4重量份、丹參總酚酸3重量份。

3.如權利要求1或2所述的水蛭小肽有效部位組合物，其特征在于其制備方法包含以下 步驟：

①水蛭小肽的制備：取水蛭，適當粉碎，加5～20倍量水勻漿5～15分鐘，加熱煮沸5～30 分鐘，放冷至室溫，采用鹽酸調pH至2.0±0.1，然后加入底物量0.5%～10%的胃蛋白酶，在30 ℃～45℃條件下酶解1～6小時，然后采用氫氧化鈉溶液調節pH至7～10，加入底物量0.5%～ 10%的胰蛋白酶，在45℃～55℃條件下酶解1～6小時，時時攪拌并調節pH在7～10范圍內，酶 解完畢后繼續升溫煮沸5～15分鐘，放冷，離心，收集上清液，調節pH6.5～7.0，加入1%～3% 的活性炭，攪拌均勻，濾過，濾液用截留相對分子質量為3kD的中空纖維膜進行超濾，收集透 過液，再以截留相對分子質量為150D～300D的陶瓷膜進行納濾，收集未透過液，減壓濃縮， 干燥，得水蛭小肽；其中水蛭小肽的含量為50%～90%；

②黃芪總皂苷的制備：取黃芪，適當粉碎，加8～20倍量PH2～5的酸水煎煮1～3次，每次 1～2小時，分次過濾，合并過濾，將濾液濃縮至相對密度為1.06～1.16，加入2～5BV80％～ 100％的乙醇，靜置2～48小時，取上清液回收乙醇，然后濃縮至相對密度為1.02～1.06的清 膏；將清膏放入大孔樹脂柱中，然后用10～20BV水洗脫1～2次，再用5～20BV的pH值為8～14 的水洗脫1～2次，最后5～30BV20％～40％的乙醇洗脫1～2次，棄去洗脫液，再用5～30BV為 60％～70％的乙醇洗脫1次，收集洗脫液，在60℃～120℃溫度下，干燥4～24小時，即得黃芪 總皂苷；其中黃芪甲苷含量為50％～80%；

③當歸總酚酸的制備：取適當粉碎的當歸藥材，加入10～14倍量60%～80%的乙醇提取2 ～4次，每次1～2小時，合并提取液，離心，取上清液，減壓濃縮，干燥，得醇提物干粉，加水溶 解，離心，取上清液，用鹽酸調至PH為2.5～3.5，通過D-101大孔樹脂柱，然后用水洗至流出 液無色，再用濃度為60%～80%的乙醇溶液以4mL/min的流速進行洗脫，收集醇洗液，揮干溶 劑，干燥得提取物干粉，用等量的乙酸乙酯萃取2～4次，合并萃取液，用少量水洗滌萃取液， 分取乙酸乙酯層，揮干溶劑，干燥得提取物；其中阿魏酸的含量為0.1%～3%；

④丹參總酚酸的制備：丹參粗粉，加4～10倍量的水或醇水溶液提取2～4次，每次1.0～ 2.0小時，濾過；合并濾液，3000～5000rpm離心5～15分鐘，取上清液過D1400型大孔吸附樹 脂柱，先用水洗至糖檢測反應為陰性，改用10～35％醇水溶液洗2～10BV；用40～80％醇水 溶液洗脫，收集洗脫液，同時分析測定洗脫液中丹酚酸A和丹酚酸B的含量，當丹酚酸A∶丹酚 酸B＝0.90～1.10∶1時，收集該部分洗脫液，50～70℃減壓濃縮洗脫液至無醇味；加鹽酸調 節PH值至3～5，用1～2BV有機溶劑萃取2～4次，合并有機溶劑相；減壓濃縮萃取液至浸膏 狀，50～70℃真空干燥5～7小時，得黃色粉末，即丹參總酚酸；其中丹酚酸B的含量為40%～ 60％；

⑤按照各有效部位的重量配比取上述四份有效部位，不加輔料或加入藥劑學常規輔 料，制成藥劑學上可以接受的劑型。

4.權利要求1或2所述的水蛭小肽有效部位組合物用于治療腎病、心血管疾病。