[發(fā)明專利]一種利用赤霉菌合成11α;15α-diOH-沃氏氧化物的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610017919.0 | 申請(qǐng)日： | 2016-01-12 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105483028B | 公開（公告）日： | 2019-01-08 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 許正宏;李會(huì);史勁松;倪瑜 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 江南大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N1/14 | 分類號(hào)： | C12N1/14;C12P33/06;C12R1/645 |
| 代理公司： | 無錫華源專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32228 | 代理人： | 聶啟新 |
| 地址： | 214122 江蘇*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 利用 霉菌 合成 11 15 dioh 氧化物 方法 | ||
1.一種利用赤霉菌CGMCC No.4903轉(zhuǎn)化沃氏氧化物為11α,15α-diOH-沃氏氧化物的方法，其特征為：該菌株為赤霉菌（
（1）將赤霉菌作為生產(chǎn)菌種從PDA平板上接入到種子培養(yǎng)基中，25~35°C，150~220 r/min條件下培養(yǎng)12~20 h，得到種子液；種子培養(yǎng)基的成分及配比為葡萄糖10~30 g/L；酵母粉5~15 g/L；NaCl 0.5~2 g/L；KH2PO4 1~5 g/L；調(diào) pH至 7.0，121°C高壓蒸汽滅菌15~20min；
（2）將種子液以體積百分比4%~ 8%的接種量接種于發(fā)酵培養(yǎng)基，裝液量為250 mL錐形瓶中裝25~50 mL發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度25~35°C，在150~220 r/min轉(zhuǎn)速下培養(yǎng)20~24 h，得發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基的成分及配比為葡萄糖10~30 g/L；酵母粉5~15 g/L；玉米漿1~5 g/L；pH自然，121°C高壓蒸汽滅菌15~20 min；
（3）制備赤霉菌CGMCC No.4903的靜息細(xì)胞：將步驟（2）中得到的發(fā)酵液中培養(yǎng)好的菌體用0.2M PBS緩沖液洗滌3次，然后重懸于新鮮的30mL/250mL PBS緩沖液；
（4）準(zhǔn)確稱取適量沃氏氧化物加入到步驟（3）的靜息細(xì)胞中，使沃氏氧化物終濃度為4~8g/L，在轉(zhuǎn)化溫度28℃，200~220r/min轉(zhuǎn)速下轉(zhuǎn)化48~72 h，即得轉(zhuǎn)化液。
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