[發明專利]一種檢測吡蟲啉的膠體金試紙條及其應用

有效

• 申請號: 201610015347.2
• 申請日: 2016-01-11
• 公開（公告）號: CN105675874B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 馮才偉;羅曉琴;馮靜;萬宇平;王兆芹;蒲小容;魏麗麗;王建霞
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/531;G01N33/532;G01N21/78
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1.一種檢測吡蟲啉的膠體金試紙條，包括樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊和底板，所述反應膜上具有包被有吡蟲啉半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線，所述結合物釋放墊噴涂有吡蟲啉單克隆抗體-膠體金標記物，所述吡蟲啉半抗原-載體蛋白偶聯物由吡蟲啉半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白或人血清白蛋白，其特征在于所述吡蟲啉半抗原是以2-氯-5-甲基吡啶-3-甲醛為起始原料，經過溴代反應，得到中間體2-氯-5-甲基溴代吡啶-3-甲醛產物，而后與2-硝基亞氨基咪唑烷進行親核取代反應，得到醛基化的吡蟲啉產物，再與氨基乙酸縮合，獲得帶有間隔臂的羧基吡蟲啉半抗原，其分子結構式為：

。

2.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊依次粘貼在底板上。

3.如權利要求1-2任一項所述的試紙條，其特征在于所述結合物釋放墊1/3~1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

4.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述吡蟲啉單克隆抗體是以吡蟲啉半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述羊抗鼠抗抗體是將鼠源抗體免疫羊得到。

5.一種制備權利要求1-4任一項所述試紙條的方法，其包括步驟：

1）制備噴涂有吡蟲啉單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

2）制備具有包被有吡蟲啉半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線的反應膜；

3）將1）和2）制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

6.一種檢測煙草中吡蟲啉殘留的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

1）樣品前處理；

2）用權利要求1-4任一項所述的試紙條進行檢測；

3）分析檢測結果。