[發明專利]一種植物乳桿菌及其在暖季型牧草青貯中的應用

在審

• 申請號: 201610012145.2
• 申請日: 2016-01-08
• 公開（公告）號: CN105567594A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 玉柱;張慶;張英俊;楊富裕
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A23K20/189;C12R1/25
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 黃家俊

技術領域

本發明屬于牧草飼料加工貯藏領域，特別涉及一種植物乳桿菌及其在暖季型牧草青貯中的應用。

背景技術

隨著我國畜牧業的發展，對動物飼料的需求越來越高。暖季型牧草，如象草、蘇丹草等，多原產于非洲；產量與營養價值高，且消化率高適口性好，牛、羊、馬均喜食，是我國非常重要的動物飼料來源。

暖季型牧草多種植于我國南方，南方夏季多雨，調制干草比較困難。青貯能夠解決在雨季、濕潤多雨地區的干草不宜調制的問題，同時能夠降低因干草調制造成的葉片脫落、雨淋、霉變等損失；但是暖季型牧草本身含水量高，糖分含量少，常規青貯很難成功。

乳酸菌制劑的使用可增加青貯初期發酵時的乳酸菌數量，對保證青貯飼料盡快進入乳酸發酵階段非常有效，從而使pH值迅速下降，蛋白水解作用減弱，青貯飼料中氨態氮含量減少。在美國、加拿大、瑞士、德國、日本等發達國家，為了用不同作物調制出優質青貯，都在廣泛研究和使用各種細菌制劑。添加乳酸菌菌劑可以明顯改善青貯品質，提高乳酸含量。目前市場上，我國乳酸菌劑較少，現有產品中多為國外進口，在推廣過程中存在成本高的缺陷。

隨著酶工程技術的不斷發展，酶制劑的應用也越來越受到人們的重視。目前，青貯中使用的酶制劑主要是纖維素酶、淀粉酶和木聚糖酶等。這些酶通過降解粗飼料中的纖維素、半纖維素和淀粉等多糖，成為單糖，可有效解決青貯中可發酵底物不足、纖維含量過高的問題，從而達到促進乳酸發酵，提高飼料利用率及動物生產性能的目的。在實際應用中常是酶與乳酸菌菌劑配合使用，以期發揮添加劑的最大效應。該類添加劑已經在豆科牧草，玉米秸稈等青貯中利用，但目前仍沒有單獨適用于暖季型牧草的類似的生物添加劑。

發明內容

本發明針對現有技術中的不足，提供了一種植物乳桿菌及其在暖季型牧草青貯中的應用。

為了實現上述目的，本發明采取的技術方案如下：

一種植物乳桿菌，所述的植物乳桿菌菌株為LP1，分類命名為Lactobacillusplantarum，在中國普通微生物菌種保藏管理中心的保藏號為CGMCCNo.10473。

所述植物乳桿菌的16SrDNA基因序列如SEQIDNo.1所示。

所述的植物乳桿菌的生物學特性為：菌株在固體培養基上30℃培養48h，生長良好，可形成邊緣整齊的乳白色菌落；菌株革蘭氏染色呈陽性，顯微鏡下的細胞形態為短桿狀、無芽孢；氧化酶陰性，具有較強的生長及產酸性能；在起始pH值為3.5-8.0的培養基上能生長，在10℃條件下呈現微弱生長，在15℃-40℃條件下生長狀況良好，在不大于6.5％NaCl的條件下生長狀況良好。

所述的植物乳桿菌在制備暖季型牧草青貯飼料中的應用。

一種生物添加劑，所述的生物添加劑包括植物乳桿菌LP1和纖維素酶。

所述生物添加劑在制備暖季型牧草青貯飼料中的應用。

所述暖季型牧草青貯飼料的制備方法為：將植物乳桿菌LP1與纖維素酶加水活化15-30min后，噴灑在刈割并切短的暖季型牧草上混合均勻，然后將暖季型牧草壓實密封進行發酵，獲得暖季型牧草青貯飼料。

所述植物乳桿菌LP1的添加量不低于10⁹CFU/kg暖季型牧草，纖維素酶的添加量不低于100U/kg暖季型牧草，所述暖季型牧草壓實后的密度為500kg/m³以上。

獲得的暖季型牧草青貯飼料，其pH小于4，乳酸含量提高，氨態氮含量下降，丁酸含量低于檢測限。

所述發酵的條件為：發酵溫度為15-25℃，發酵時間為30-60d。

本發明的有益效果為：與自然青貯相比，接種植物乳桿菌LP1與纖維素酶制成的生物添加劑后，暖季型牧草青貯的pH明顯降低，達到4.0以下；乳酸含量得到明顯提高，同時氨態氮含量下降，丁酸含量低于檢測限，明顯提高了暖季型牧草青貯的發酵品質。所述的生物添加劑不僅效率高，而且對家畜健康無不良影響，對環境無污染，添加過程易于掌握，可廣泛應用于暖季型牧草青貯飼料的制備領域。

生物材料保藏說明

分類命名：植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)；菌株編號：LP1。

保藏機構：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心

保藏機構簡稱：CGMCC

地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號

保藏日期：2015年1月30日