[發明專利]一種何首烏葉片誘導培養基及其配制方法

在審

• 申請號: 201610011337.1
• 申請日: 2016-01-09
• 公開（公告）號: CN105638471A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 何志鏗
• 申請（專利權）人: 佛山市金藍領教育科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及何首烏組織培養技術領域，特別是涉及一種何首烏葉片誘導培養基， 還涉及一種何首烏葉片誘導培養基配制方法。

背景技術

何首烏，是蓼科何首烏屬多年生纏繞藤本植物，塊根肥厚，長橢圓形，黑褐色，其塊 根入藥，可安神、養血、活絡、消癰，是常見的中藥材。

目前何首烏人工繁殖主要采用扦插和組織培養，現有的何首烏組織培養技術多以 莖段和莖尖作為外植體，但是以莖尖和莖段作為外植體不僅僅對母體傷害大，而且取材不 容易。

發明內容

基于現有技術存在上述問題，本發明提供一種何首烏葉片誘導培養基，該培養基 以MS培養基為基礎培養基，并添加有TDZ（噻苯?。?-BA(6-芐氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁 酸）、椰乳、瓊脂粉、蔗糖，以何首烏葉片作為外置體，不僅僅取材容易簡單，還能降低取材對 母體的傷害，同時本培養基還具有誘導率高的優點。

一種何首烏葉片誘導培養基，其以MS培養基為基礎培養基，并添加有TDZ（噻苯 隆）、6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、椰乳、瓊脂粉、蔗糖，椰乳為椰子的液態胚乳， 具有多種植物生長所需的營養物質和調節物質，能更好地促進何首烏葉片脫分化，誘導出 愈傷組織。

TDZ（噻苯?。┑臐舛葹?.001-0.01mg/L，6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)的濃度為1- 1.5mg/L，IBA（吲哚丁酸）的濃度為0.2-0.8mg/L，椰乳的濃度為150-200mg/L，瓊脂粉的濃 度為8～11g/L，蔗糖的濃度為25～35g/L。

TDZ（噻苯?。┑臐舛葹?.004-0.006mg/L，6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)的濃度為1.2- 1.4mg/L，IBA（吲哚丁酸）的濃度為0.4-0.6mg/L，椰乳的濃度為180-190mg/L，瓊脂粉的濃 度為9～10g/L，蔗糖的濃度為28～32g/L。

何首烏葉片誘導培養基的pH值為5.8~6.5。

何首烏葉片誘導培養基的pH值為6.3，微酸性的組培環境有利于提高脫分化相關 酶類的活性，誘導何首烏葉片長出愈傷組織。

椰乳是從沒成熟的椰汁果實中采集，成熟的椰子果實已經消耗了部分椰乳中的營 養物質，改變了椰乳的成分。

一種何首烏葉片誘導培養基的配制方法，其包括以下步驟：

步驟S10溶解配制培養基：用蒸餾水溶解MS基礎培養基各成分，并添加TDZ（噻苯隆）、6- BA(6-芐氨基腺嘌呤)、IBA（吲哚丁酸）、椰乳、瓊脂粉、蔗糖；

步驟S20高溫滅菌：將步驟S10配制好的培養基放于高壓滅菌鍋中，于120~121℃高溫滅 菌20~21分鐘，冷卻凝固。

步驟S10還包括步驟S11調節pH值：使用HCL和KOH滴定調節培養基pH值至6.3。

具體實施方式

實施例一：配制何首烏葉片誘導培養基。

根據表1所示的MS培養基配方以及表2所示的何首烏葉片誘導培養基配方，配制本 發明所述的何首烏葉片誘導培養基。

用天平稱取MS培養基中的各成分以及TDZ（噻苯?。?、6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)、IBA （吲哚丁酸）、椰乳、瓊脂粉、蔗糖，置于三角瓶中，加入適量蒸餾水，攪拌溶解，并調節pH值至 6.3，定容至1000mL。將三角瓶封口，置于高壓滅菌鍋中，于121℃滅菌20min，然后置于超凈 工作臺中自然冷卻，備用。

將冷卻到50-60℃時將培養基分裝至組織培養瓶中，晾涼，待其凝固后將組織培養 瓶封口，備用。

表1MS培養基的成分及其用量。

表2何首烏葉片誘導培養基的成分及其用量。

實施例二：本發明所述的何首烏葉片誘導培養基的測試

根據表1所示的MS培養基配方以及表3所示的何首烏葉片誘導培養基配方，參照實施例 一所述的培養基制備方法，分別配制各試驗組、對照組的何首烏葉片誘導培養基。

表3何首烏葉片誘導培養基。

備注：對照組1為現有技術對照組，采用何首烏莖段作為外植體。