[發明專利]一種何首烏促進生根培養基及其配制方法在審
| 申請號: | 201610011325.9 | 申請日: | 2016-01-09 |
| 公開(公告)號: | CN105519438A | 公開(公告)日: | 2016-04-27 |
| 發明(設計)人: | 何志鏗 | 申請(專利權)人: | 佛山市金藍領教育科技有限公司 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 何首烏 促進 生根 培養基 及其 配制 方法 | ||
技術領域
本發明屬于何首烏組織培養技術領域,特別涉及一種何首烏促進生根培養基,還 涉及一種何首烏促進生根培養基的配制方法。
背景技術
何首烏,是蓼科何首烏屬多年生纏繞藤本植物,塊根肥厚,長橢圓形,黑褐色,其塊 根入藥,可安神、養血、活絡、消癰,是常見的中藥材。
目前組織培養是何首烏人工快速繁殖的常用手段之一,然而現有的組織培養技術 中何首烏出根培養的發根率不高,影響何首烏的組培快繁效率,同時因不能發根而造成大 量何首烏芽苗褐化死亡,浪費生產資源。
發明內容
基于現有技術存在上述問題,本發明提供一種何首烏促進生根培養基,其以1/2 MS培養基為基礎培養基,并添加有NAA(萘乙酸)、KT(激動素)、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和 白砂糖,其具有發根率高、節約生產資源的優點。
一種何首烏促進生根培養基,以1/2MS培養基為基礎培養基,并添加有NAA(萘乙 酸)、KT(激動素)、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖。
1/2MS培養基為常規MS培養基大量元素濃度減少一半而制成,MS培養基為高鹽培 養基,采用1/2MS培養基可以降低無機鹽的濃度,更有利于促進何首烏芽發根。
NAA(萘乙酸)的濃度為0.2-0.8mg/L,KT(激動素)的濃度為0.1-0.6mg/L,含鈰可 溶性化合物的濃度為0.1-0.2mM,瓊脂粉的濃度為8~11g/L,蔗糖的濃度為25~35g/L。
NAA(萘乙酸)的濃度為0.3-0.7mg/L,KT(激動素)的濃度為0.2-0.4mg/L,含鈰可 溶性化合物的濃度為0.14-0.18mM,瓊脂粉的濃度為9~10g/L,蔗糖的濃度為28~33g/L。
所述的何首烏葉片誘導培養基的pH值為6.3~6.6。
所述的何首烏葉片誘導培養基的pH值為6.4。
所述的含鈰可溶性化合物是硝酸鈰,還可以是氧化鈰和氯化鈰,稀土元素鈰能促 調節細胞內酶的活性,促進細胞合成生物堿,調節細胞生長和分化,何首烏芽苗生根。
一種何首烏促進生根培養基的配制方法,其包括以下步驟:
步驟S10溶解配制培養基:用蒸餾水溶解1/2MS基礎培養基各成分,并添加NAA(萘乙 酸)、KT(激動素)、含鈰可溶性化合物、瓊脂粉和白砂糖;
步驟S20高溫滅菌:將步驟S10配制好的培養基放于高壓滅菌鍋中,于120~121℃高溫滅 菌20~21分鐘,冷卻凝固。
步驟S10還包括步驟S11調節pH值:使用HCL和KOH滴定調節培養基pH值至6.4。
具體實施方式
實施例一:配制何首烏促進生根培養基。
根據表1所示的1/2MS培養基配方以及表2所示的何首烏促進生根培養基配方,配 制本發明所述的何首烏促進生根培養基。
用天平稱取1/2MS培養基中的各成分以及NAA(萘乙酸)、KT(激動素)、含鈰可溶性 化合物、瓊脂粉和白砂糖,置于三角瓶中,加入適量蒸餾水,攪拌溶解,并調節pH值至6.4,定 容至1000mL。將三角瓶封口,置于高壓滅菌鍋中,于121℃滅菌20min,然后置于超凈工作臺 中自然冷卻,備用。
將冷卻到50-60℃時將培養基分裝至組織培養瓶中,晾涼,待其凝固后將組織培養 瓶封口,備用。
表11/2MS培養基的成分及其用量。
表2何首烏促進生根培養基的成分及其用量。
實施例二:本發明所述的何首烏促進生根培養基的測試
根據表1所示的1/2MS培養基配方以及表3所示的何首烏促進生根培養基配方,參照實 施例一所述的培養基制備方法,分別配制各試驗組、對照組的何首烏促進生根培養基。
表3何首烏促進生根培養基。
在超凈工作臺中選取生長正常、無褐化的何首烏叢生芽,將叢生芽取出,用無菌手 術刀將叢生芽分割成單芽,并將生長良好、無褐化、強壯的單芽接種于表3所示各試驗組、對 照組的培養基中,然后于光暗周期為12h光照/12h黑暗、光照強度為2000lux、溫度為25±2 ℃的條件下進行培養。培養20天后統計何首烏芽發根率和平均單株發根數。
表4何首烏促進生根養基測試結果。
由表4所示的結果得知,稀土元素鈰對何首烏生根起這巨大的促進作用,可以將發 根率提高到90%以上,同時單株發根數也提高到5條以上,可以大大提高何首烏移栽成活率。 另外從試驗組2、6、7與其他實驗組的結果得知,稀土元素鈰的使用量對何首烏生根促進作 用有影響,使用濃度太高不會取得更好的促進效果,反而會起抑制作用。
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