[發明專利]一種紅豆杉的雜交育種方法

有效

• 申請號: 201610011078.2
• 申請日: 2016-01-10
• 公開（公告）號: CN105638436B
• 公開（公告）日: 2017-07-07
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01G17/00;A01C1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及植物的雜交育種方法，具體涉及一種紅豆杉的雜交育種方法，屬于木本植物品種選育的技術領域。

背景技術

紅豆杉，又稱紫杉，屬國家一級保護的珍貴樹種，天然林資源已枯竭。紅豆杉是常綠喬木，樹干通直，樹姿優美，種子成熟時呈紅色，假皮鮮艷奪目，是優良的盆景和綠化樹種。紅豆杉木材堅固耐用，紋理秀麗，根、莖都是高檔的雕刻材料，是屬于特種用林材；它的根、莖、皮、葉均含有紫杉醇，是當今世界公認的治癌藥物，葉可通經、利尿、降血壓，對防治糖尿病及心血管疾病有明顯效果，是價值昂貴的藥用林。近年紅豆杉盆景在花木市場也呼之欲出，成為令人矚目的新貴。紅豆杉盆景放在室內具有明顯的驅趕蚊蟲和凈化空氣的效果，它吸收二氧化碳、一氧化碳、尼古丁、二氧化硫等有害物質，還能吸收甲醛、苯、甲苯、二甲苯等致癌物質，呼出氧氣，起到防癌抗癌保健和凈化空氣作用，是家庭居室、酒店、賓館及辦公場所美化環境的珍貴植物。

紅豆杉屬植物，雌雄異株，雄球花單生于葉腋，雌球花的胚珠單生于花軸上部側生短軸的頂端，基部有圓盤狀假種皮，假種皮杯狀，紅色。本屬樹種為淺根植物，其主根不明顯、側根發達，耐蔭性強，耐修剪、耐寒、耐病蟲害，在天然林中生長緩慢，分布星散，野生樹木日漸減少，是世界上公認的瀕臨滅絕的天然珍稀抗癌植物。由于紅豆杉屬植物不同種之間雄花的花期不同，且同種紅豆杉的雌雄株花期不同步，造成授粉困難，嚴重影響了紅豆杉屬植物的雜交育種進程。

雜交育種對紅豆杉的開發和推廣利用都具有著非常重要的意義。

發明內容

本發明解決的技術問題是提供了一種紅豆杉的雜交育種方法，解決紅豆杉屬植株種間花期不同步導致授粉育種困難的問題。

為了達到上述目的，本發明提供了一種紅豆杉的雜交育種方法，包括如下步驟：

（1）花粉采集：于2月份，分別采集南方紅豆杉（Taxus wallichiana var. mairei）和曼地亞紅豆杉（Taxus × media）的雄株的花粉，自然干燥，剔除雜質后，分別置于EP管4℃冷藏備用，并保持干燥；

（2）授粉：到3月份，雌株進入吐水期，取出儲存的花粉，室溫放置一小時使其恢復常溫；按照花粉：超純水= 1:1000 的重量比例配置成花粉液，按照南方紅豆杉花粉授粉曼地亞雌株，曼地亞紅豆杉花粉授粉南方紅豆杉雌株，分別噴施雌株，每隔四天使用噴壺噴施一次，共授粉3次；單株處理可采用滅菌棉簽沾花粉涂抹吐水期雌花進行授粉；授粉后所有授粉植株進行分株隔離以防止外來花粉的干擾。

（3）施肥：授粉后，施肥，按照氮、磷、鉀比例為1:3:1，噴施3次葉面肥；

（4）掛果：掛果后噴施營養液，營養液成分為：N200mg/L、P33mg/L、 K66mg/L，磷肥以NH₄H₂PO₄ 形式加入，鉀肥以KNO₃形式加入，氮肥除以NH₄H₂PO₄和KNO₃的形式加入外，不足部分用（NH₄）₂SO₄ 補充。

保證植株養分供給；待種子成熟后，分別從母本植株上采集不同父本授粉育種種子，獲得純種和雜交種種子；

（5）沙藏：將采集的種子冷水浸種5天，每天換水一次，浸種后將種子表面水分晾干，低溫沙藏，按沙子：種子3:1進行；

（6）播種：春季，將沙藏的種子滅菌后，進行激素浸種，用300mg/L GA₃+20mg/L 6-BA +30mg/LKT+10mg/LABT浸泡種子24小時，后播種，獲得無菌試管苗。

（7）移栽：將無菌試管苗自然光遮光度下煉苗10～15天，然后將其取出，洗凈根部的培養基，將其根部浸泡在復合微生物制劑中，30min，促進紅豆杉植株新根的生長；

所述復合微生物制劑包括以下重量配比的原料：假絲酵母菌發酵液：產黃纖維單胞菌發酵液：枯草芽孢桿菌發酵液：赤霉素：活性炭：磷酸氫二鈉＝5：3：1：2：1：1；

所述假絲酵母菌具體為假絲酵母菌（Candida utilis）ATCC No.22023;

所述產黃纖維單胞菌具體為產黃纖維單胞菌（cellulomonas flavigena）ATCC No.482

所述枯草芽孢桿菌具體為枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）CGMCC No：0954（參見CN1554744）；