[發明專利]一種用于標記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的合成及應用

在審

• 申請號: 201610008486.2
• 申請日: 2016-01-08
• 公開（公告）號: CN105566308A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 董秀麗;陳向明
• 申請（專利權）人: 濱州醫學院
• 主分類號: C07D409/04
• 分類號: C07D409/04;C09K11/06
• 代理公司: 北京國智京通知識產權代理有限公司 11501
• 代理人: 孫文彬

1.一種用于標記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的合成，其特征在于， 包括以下步驟：

1)2-噻吩-2-1H-菲[9,10-d]并咪唑的合成，在1000mL三口燒瓶中， 分別加入16g9,10-菲醌、12mL2-噻吩甲醛、120g醋酸銨和300mL冰醋酸， 在機械攪拌的條件下快速加熱到80-90℃，保持溫度攪拌反應3h。反應物 冷卻至室溫后倒入燒杯中，用氨水調節pH至7-8，過濾，固體用水洗2次 后放暗處干燥。干燥后的固體用乙腈/DMF(5:1，v/v)重結晶三次，得棕 色晶體，產率88％。

2)2-(2-噻吩-2-基-菲[9,10-d]并咪唑-1-基)-乙醇的合成，在500mL 燒瓶中，分別加入9g2-噻吩-2-1H-菲[9,10-d]并咪唑，痕量氫氧化鉀和 100mLDMF，在攪拌的條件下加熱到沸騰后，把3.2g的碳酸亞乙酯分三次在 1h內加入到燒瓶中，在繼續加熱5h。反應完畢冷卻到室溫后，燒瓶中的混 合物倒入到300mL水中，過濾并用水和60％乙醇依次洗滌固體。固體干燥后 用乙腈/DMF(4:1，v/v)重結晶三次，得黃色晶體，產率51％。

3)2-(2-噻吩-2-基-菲[9,10-d]并咪唑-1-基)-對甲苯磺酸乙酯 (TSTPE)的合成，在100mL燒瓶中，分別加入3g對甲基苯磺酰氯和20mL 吡啶，冷卻至0℃。把6g2-(2-噻吩-2-基-菲[9,10-d]并咪唑-1-基)-乙 醇溶解在10mL吡啶中滴加到燒瓶中的溶液里，保持溶液在0℃攪拌反應 4h，繼續在室溫下攪拌反應10h后，反應物倒入適量冰水中并攪拌0.5h。 過濾，固體用水洗滌，干燥后用乙腈重結晶3次，得淺黃色晶體，產率91％。

2.一種用于標記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的應用，其特征在于， 將熒光衍生試劑用于標記脂肪酸類化合物：濃度為1.0×10^-4mol·L-1的混合 脂肪酸(C5-C30)標準溶液用乙腈/DMF(1:1,v/v)溶解；準確稱取0.5gTSTPE， 用DMF溶解并定容至10mL，得濃度為1.0×10^-2mol·L-1的熒光衍生試劑溶 液；向盛有10mg無水K₂CO₃的2mL安培瓶中依次加入400μLDMF，100μL 混合脂肪酸標準溶液，220μL熒光衍生試劑溶液，封口后于85℃恒溫水 浴下振蕩反應30min，得到穩定的熒光產物。