[發明專利]作為骨肉瘤診治靶標的miRNA

有效

• 申請號: 201610003305.7
• 申請日: 2016-01-04
• 公開（公告）號: CN105441565B
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發明（設計）人: 楊祚璋;張瞾昕;夏俊峰;李惠玲;張婭;李素
• 申請（專利權）人: 楊祚璋
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 孟祥斌;朱萍

本發明公開了miR?4714?3p作為骨肉瘤診斷標志物的用途。本發明通過高通量測序和QPCR實驗證明miR?4714?3p在正常人和骨肉瘤患者血液中的含量存在顯著差異，因此認為miR?4714?3p可以作為診斷骨肉瘤的分子標志物以用于開發診斷骨肉瘤的產品，該診斷產品具有以下優勢：無創、快速、靈敏，在臨床上具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及miR-4714-3p在診治骨肉瘤中的用途。

背景技術

骨肉瘤是來源于間葉組織的惡性腫瘤，其主要致病特征為體內增殖的腫瘤細胞直接形成未成熟骨或骨樣組織。是一種人類骨骼系統最常見的原發性惡性腫瘤。典型的骨肉瘤是一種罕見的(占全部惡性腫瘤的0.2％)高致癌惡性腫瘤，其發病率約每年每一百萬人里有三例。骨肉瘤主要出現在較長的骨骼以及少部分的軟組織。其主要發病人群集中在10～20歲青少年，具有發病率高，早期轉移率高，治愈生存率低等特點。X-射線，斷層攝影技術，核磁共振，血管造影技術以及動態骨閃爍攝影技術等廣泛應用于該病的診斷、腫瘤發生的程度及手術類型判斷等等。但是利用上述臨床手段進行骨肉瘤的診斷，常常導致患者的病情延誤，錯過最佳治療時期。因此尋找一種骨肉瘤早期診斷標志物是亟待解決的問題。

miRNA是天然存在于體內的21-22nt的非編碼RNA分子，是一類通過轉錄后基因沉默對靶基因表達進行調節的RNA。據估計，生物體內約有1/3的基因受miRNA的調控。miRNA與RISC的復合體通過堿基配對可與靶基因mRNA5’-UTR或者3’-UTR中的互補序列相結合，抑制蛋白質翻譯，或是引發mRNA降解，從而負調控靶基因的表達。

檢測miRNA的表達水平可以為疾病的臨床診斷提供參考。而miRNA的異常表達直接導致一些與疾病發生相關基因的表達異常，誘發疾病的發生。已有報道證明miRNA可以通過調控靶基因mRNA的表達，在疾病發生、發展及轉移中發揮重要作用。在未來臨床治療中，miRNA不僅可以成為新的疾病早期診斷和疾病進程相關的標記物，而且也有望通過改變miRNA的表達或者其靶基因的表達治療疾病。尋找和鑒定與疾病發生相關的miRNA及其靶基因為miRNA的臨床治療提供基礎。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種可用于早期診斷骨肉瘤的微小RNA標記物。

本發明的目的之二在于提供上述微小RNA的用途。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

本發明提供了一種微小RNA在制備骨肉瘤診斷工具中的應用，所述微小RNA選自以下組：初始miRNA、前體miRNA、成熟miRNA；初始miRNA能在人細胞內被剪切并表達成成熟miRNA；前體miRNA能在人細胞內被剪切并表達成成熟miRNA；所述微小RNA是miR-4714-3p。

應當知道，本發明的微小RNA包括組成型核酸分子的功能等同物，即變體，其顯示完整微小RNA核酸分子相同的功能，盡管它們通過核苷酸殘基的缺失、置換或者插入而突變。

本領域人員應該了解，為了保證微小RNA的穩定性，可以在微小RNA的一端或者兩端增加保護性堿基，如TT，也可對微小RNA堿基進行修飾，但是上述修飾不影響微小RNA的功能。因此，本領域技術人員熟知，在不影響miR-4714-3p功能的條件下，對miR-4714-3p進行堿基修飾或者在兩端增加堿基獲得的序列同樣包含在本發明的保護范圍之內。

在本發明的一些具體的實施方式中，所述miR-4714-3p是成熟miR-4714-3p。

雖然在某些具體實施方式中所使用的是成熟miRNA，但是本領域技術人員可以預期，初始miRNA、前體miRNA將可以獲得與成熟miRNA同樣的技術效果，因為細胞有能力進一步將初始miRNA、前體miRNA加工為成熟miRNA。