[發明專利]一種單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 201610003044.9
• 申請日: 2016-01-05
• 公開（公告）號: CN105542000B
• 公開（公告）日: 2020-03-10
• 發明（設計）人: 田克恭;韓水仲
• 申請（專利權）人: 洛陽普萊柯萬泰生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;A61K39/42;A61P31/20;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

本發明公開了一種單克隆抗體及其應用，所述單克隆抗體為抗豬圓環病毒2型單克隆抗體3H11，主要用于含該單克隆抗體3H11的豬圓環病毒2型抗體檢測試劑盒、抗原檢測試劑盒、藥物組合物，屬于生物醫藥領域。本發明提供抗體檢測試劑盒可區分PCV1和PCV2的感染，以便對豬群的免疫狀況進行實時監測，為防止PCV2感染起到重要作用；抗原檢測試劑盒可實現檢測樣品中的PCV2抗原，減少了假陽性率，對控制PCV2的感染具有重要意義。本發明的單克隆抗體3H11對豬圓環病毒病具有預防和/或治療作用，彌補現有疫苗單一的預防作用。

技術領域

本發明涉及抗豬圓環病毒2型單克隆抗體、含該單克隆抗體的藥物組合物、抗體檢測試劑盒、抗原檢測試劑盒等應用，屬于生物醫藥領域。

背景技術

豬圓環病毒(Circoviridae，Circovirus，Porcine circovirus，PCV)是迄今發現的一種最小的動物病毒，病毒直徑約17nm，環狀，單股DNA病毒，具有兩個血清型即PCV1和PCV2。其中，PCV1沒有致病性；PCV2具有致病性，可引發一系列豬圓環病毒病(PorcineCircovirus diseases，PCVD)包括斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PostweaningMultisystcmic Wasting Syndrome，PMWS)、仔豬A2型先天震顫(A2CT)、豬繁殖障礙、豬皮炎腎炎綜合征(PDNS)、增生性壞死性肺炎(PNP)和呼吸道疾病綜合征(PRDS)，特別是PMWS的主要病原。PMWS主要侵害6-8周齡的仔豬，發病率一般為10％-20％，病死率高達50％-100％，并能造成免疫抑制降低抗病力；成年豬一般為隱性感染，不表現任何癥狀，但可以傳染給仔豬。這些疾病的廣泛流行嚴重影響了養豬業的發展，給許多國家和地區帶來了巨大的損失。

目前，PCV2抗體的檢測方法包括免疫過氧化物酶單層試驗(IPMA)、間接免疫熒光試驗(IFA)、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，但IPMA、IFA不能區分PCV1和PCV2的抗原交叉反應，且操作復雜，耗時耗力；現有ELISA試劑盒包括國外試劑盒(荷蘭Biochek公司的PCV2ELISASK105、韓國金諾公司的PCV2ELISA)和國內試劑盒(以間接ELISA抗體檢測試劑盒為主，如中國動物衛生與流行病學中心的PCV2ELISA抗體檢測試劑盒、浙江大學的PCV2-dCap-ELISA抗體檢測試劑盒)，這些試劑盒均不能區分PCV1交叉抗體的問題。

臨床上，PCV1與PCV2經?；旌细腥?，雖然PCV1不會引起發病，但會交叉干擾PCV2感染的檢測。免疫學試驗表明，PCV1病毒與PCV2病毒有明顯發交叉反應。因此，檢測PCV2感染的關鍵技術在于如何盡可能地排除PCV1的干擾，減少假陽性結果。鑒于此，為了更為準確地檢測PCV2，亟需建立一種檢測方法。

發明內容

為了解決現有技術的不足，本發明提供了一種抗豬圓環病毒2型單克隆抗體及其應用，該單克隆抗體可用于檢測豬圓環病毒2型抗體、抗原，還可以預防和/或治療豬圓環病毒病。

本發明涉及一種特異性結合豬圓環病毒2型的單克隆抗體PCV2-McAB2的可變區序列，其中，1)重鏈可變區氨基酸序列為SEQ ID No.2所示的氨基酸序列或該序列經過一個或多個氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體；2)輕鏈可變區氨基酸序列為SEQ ID No.4所示的氨基酸序列或該序列經過一個或多個氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體。

本發明還涉及具有上述可變區序列的抗體或其片段，所述抗體或其片段仍保持特異性結合豬圓環病毒2型的能力。

本發明還涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包括免疫量的含有所述單克隆抗體PCV2-McAB2可變區序列的抗體或所述抗體片段，以及藥學上可接受的載體。

本發明還涉及所述藥物組合物在制備預防和/或治療豬圓環病毒2型感染相關疾病的藥物中的應用。