[發明專利]一種快速鑒定煙草品種青枯病抗性的方法

在審

• 申請號: 201610001625.9
• 申請日: 2016-01-05
• 公開（公告）號: CN105557343A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 顧鋼;徐進;馮潔;陳順輝;許景升;張昊;周挺
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司福建省公司
• 主分類號: A01G7/00
• 分類號: A01G7/00;A01H4/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種快速鑒定煙草品種青枯病抗性的方法，其特征在于：所述方法為：挑選在1/2MS 培養基上生長至4～6葉齡期、植株大小相近一致的無菌煙苗各10株，超凈工作臺內去除干 凈根系周圍附著的MS培養基，以剪刀傷根后將植株根部于細菌懸浮液中浸泡30min后，滅菌 濾紙吸干根部表面多余的菌液，重新栽回MS培養基內，滅菌水浸根作為對照，30℃、光照度 2600lx、16h光周期條件培養，隔天觀察記載發病病情，根據病情嚴重度計算病情指數。

2.根據權利要求1所述的一種快速鑒定煙草品種青枯病抗性的方法，其特征在于：所述 的病情嚴重度：病情嚴重度分為5級，標準如下：

0級——無癥狀；

1級——1個葉片萎蔫；

2級——2～3個葉片萎蔫；

3級——4片葉片萎蔫；

4級——整株死亡；

。

3.根據權利要求1所述的一種快速鑒定煙草品種青枯病抗性的方法，其特征在于：所述 的細菌懸浮液制備方法為：挑取室溫條件下保存于滅菌去離子水中的青枯菌株，于TZC培養 基平板上劃線，30℃條件下培養48h后，挑取典型的青枯菌野生型菌落，經PCR驗證陽性后， 轉至普通NA培養基平板，30℃條件下培養48h；采用比濁法，挑取強毒力純培養物，于滅菌 去離子水中配置成濃度為3×10⁶cfu/mL的細菌懸浮液。