[發(fā)明專利]兩種芋螺毒素肽、其制備方法及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201580079134.X | 申請日： | 2015-04-23 |
| 公開（公告）號： | CN107531756B | 公開（公告）日： | 2021-05-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 劉杰;林志龍;聞博;童婷;莫芬 | 申請（專利權(quán)）人： | 深圳華大生命科學研究院 |
| 主分類號： | C07K7/08 | 分類號： | C07K7/08;C07K1/00;C12N15/00;A61K38/10;A61P9/00 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 劉明海;周瑞 |
| 地址： | 518080 廣東省深*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 兩種芋螺 毒素 制備 方法 應(yīng)用 | ||
提供了兩種新的芋螺毒素肽ω?CPTx?btl1和ω?CPTx?btl2，其氨基酸序列分別如SEQ ID NO:1或2所示，還提供了編碼所述兩種肽的多核苷酸，含有所述多核苷酸的構(gòu)建體、表達載體和轉(zhuǎn)化的細胞以及所述兩種肽的制備方法，所述芋螺毒素肽可用于鈣離子通道相關(guān)疾病的治療。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及兩種新的芋螺毒素肽ω-CPTx-btl1和ω-CPTx-btl2，編碼這兩種肽的多核苷酸，含有該多核苷酸的構(gòu)建體、表達載體和宿主細胞，該肽的天然提取及人工合成方法，以及該肽的醫(yī)藥用途。
背景技術(shù)
鈣離子通道是廣泛分布于興奮細胞的跨膜蛋白，調(diào)節(jié)細胞外的Ca2+進入細胞質(zhì)，參與一系列Ca2+依賴的生理活動，如激素及神經(jīng)遞質(zhì)釋放、肌肉收縮和細胞信號傳導等。根據(jù)對電壓的敏感性不同分為低電壓激活鈣離子通道(LVA)或T-型鈣通道(Cav3.x)和高電壓激活鈣離子通道(HVA)，HVA鈣通道包括L-型(Cav1.x)、P/Q-型(Cav2.1)、N-型(Cav2.2)和R-型(Cav2.3)鈣通道。Cav1.x通道參與肌肉收縮和細胞分泌，Cav2.x參與神經(jīng)遞質(zhì)釋放和神經(jīng)元興奮調(diào)節(jié)。鈣通道由起主要功能的α亞基和輔助功能的β、γ及δ亞基組成。
鈣通道阻滯劑廣泛存在于動物毒液中，如蜈蚣、蜘蛛等，目前已開發(fā)出很多如二氫吡啶類小分子鈣通道阻滯劑藥物，典型藥物有選擇性鈣離子阻滯劑硝苯地平，該類藥物在臨床上主要應(yīng)用于治療高血壓、冠心病、心律失常、心絞痛、腦血管病等，屬當前應(yīng)用最廣泛和頻率較高的一類靶點藥物。
然而，目前已開發(fā)的多肽類鈣通道阻滯劑藥物則相對較少，如齊考諾肽是一類N-型鈣通道阻滯劑，用于治療難治性慢性疼痛。多肽類鈣通道阻滯劑因其眾多優(yōu)勢，如高選擇性、高親脂性和高安全性，將成為未來鈣通道阻滯劑藥物開發(fā)的熱點。
高血壓是當今世界最常見的心血管疾病之一，也是心腦血管疾病的主要危險因素。中國疾控中心慢病防控中心公布的研究結(jié)果顯示，我國高血壓患者人數(shù)已突破3.3億人，平均每3個成人中就有1人是高血壓患者。一線抗高血壓藥物有5類，分別是鈣通道阻滯劑(CCB)、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEⅠ)、血管緊張素受體阻滯劑(ARB)、利尿劑和β受體阻滯劑。其中，鈣通道阻滯劑是目前降壓藥零售市場的主力軍，其主要通過阻斷心肌和血管平滑肌細胞膜上的鈣離子通道，抑制細胞外的鈣離子內(nèi)流，使細胞內(nèi)鈣離子水平降低而引起心血管等組織平滑肌收縮率降低，血管舒張，從而降低血壓。
芋螺是一類廣泛分布于熱帶海洋的有毒動物，其毒液中含有大量的多肽類離子通道活性物質(zhì)，例如ω-Conotoxin，能專一阻斷電壓敏感型鈣離子通道，是開發(fā)多肽類鈣通道阻滯劑類降壓藥的重要天然資源。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供兩種新的芋螺毒素肽ω-CPTx-btl1和ω-CPTx-btl2，編碼這兩種肽的多核苷酸，含有該多核苷酸的構(gòu)建體、表達載體和轉(zhuǎn)化的宿主細胞，該肽的天然提取及人工合成方法，以及該肽的醫(yī)藥用途。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的：
第一方面，本發(fā)明提供了一種芋螺毒素肽ω-CPTx-btl1，其為如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽；并且，所述多肽的氨基酸序列內(nèi)含兩對二硫鍵，這是該芋螺毒素肽發(fā)揮鈣離子通道抑制活性的必要條件。
第二方面，本發(fā)明本發(fā)明提供了一種芋螺毒素肽ω-CPTx-btl2，其為如SEQ IDNO:2所示氨基酸序列的多肽；并且，所述多肽的氨基酸序列內(nèi)含兩對二硫鍵，這是該芋螺毒素肽發(fā)揮鈣離子通道抑制活性的必要條件。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于深圳華大生命科學研究院，未經(jīng)深圳華大生命科學研究院許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201580079134.X/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
