[發明專利]能夠在人脂肪衍生的干細胞和肝細胞中抑制丙肝病毒復制的肽及其衍生物

有效

• 申請號: 201580078911.9
• 申請日: 2015-04-16
• 公開（公告）號: CN107849091B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 林成龍
• 申請（專利權）人: 醫諾生藥開發有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K38/10;A61P23/00;A61P25/00;A61P31/16
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;羅文鋒

本發明提供了具有序列DEAQETAVSSHEQD的肽(兔α1?抗蛋白酶F的片段)及其衍生物DEAQETAVSSHEQ和QETACSSHEQD，其在hADSC和人肝細胞中顯著抑制血清攜帶的HCV復制。

發明領域

本發明涉及能夠抑制丙肝病毒復制的肽及其衍生物、其編碼多肽、載體、宿主細胞以及包含所述肽的藥物組合物以及它們的用途。

發明背景

HCV為黃病毒科(Flaviviridae)的包膜正鏈RNA病毒。它含有9.6kb基因組，其始于非翻譯區(5’-UTR)，接著是編碼結構蛋白(core、E1和E2)和包括p7、NS2、NS3、NS4A和4B、NS5A和5B在內的非結構(NS)蛋白的序列(關于綜述，參見參考文獻¹)。至少1億7千萬的人被HCV長期感染，導致每年超過350,000人死亡²。現行治療例如PEG-干擾素和抗病毒藥利巴韋林的組合使用具有許多副作用，并且僅在部分感染患者中有效。已嚴謹地嘗試新的抗HCV治療的開發(關于綜述，參見參考文獻³)，然而對于該開發，缺乏可靠和生理學的細胞培養系統來生長血清攜帶的HCV(HCVser)仍然是一個障礙。例如，HCVser的直接感染僅在原代人和黑猩猩肝細胞中顯示，并且感染是瞬時且低效的⁴。最近設計的體外基于細胞的培養方法利用HCV基因組的分子克隆，而非天然病毒(關于綜述，參見參考文獻⁵)。此外，這些模型在非原代人細胞例如肝癌細胞系⁶或神經上皮細胞系⁷中繁殖HCV。因此，關于將結果外推至臨床病毒-宿主相互作用存在憂慮。動物模型例如黑猩猩、人-肝嵌合小鼠⁸或遺傳修飾成易感于HCV感染的小鼠⁹難以獲得或建立。為克服此，在共同待審申請(PCT/CN2015/070243)中，我們成功地開發了一個平臺，其中人脂肪衍生的干細胞(hADSC)的亞類支持血清源HCV基因型1a、1b、2a、2b和混合的2a+2b的完全復制。此外，新產生的病毒對于幼稚hADSC具有感染性，并且對幼稚hADSC的系列“再感染”保持病毒復制并且總病毒滴度在6個再感染循環后可逐步放大至超過1x10¹¹個拷貝。有重大意義的是，由血清攜帶的HCV感染的hADSC產生的病毒對原代人肝細胞具有感染性。

仍對具有較少的副作用的有效藥物和治療存在需求。最近已在設計小分子作為新一代的抗HCV治療方面作出了進步，然而產生這些HCV特異性酶抑制劑是昂貴的。此外，其長期不利作用要求進一步監測。因而仍需要開發新的抗HCV療法，其由天然產物組成或來源于天然產物，會令人信服地導致更安全的特征，并且具有較低的生產成本。

發明概述

提供本概述以呈現本發明的概述，從而簡要地指出本發明的性質和實質。在理解其不用于解釋或限制權利要求的范圍或含義的情況下提出該概述。

在一方面，本公開內容提供用于在受試者中治療或預防HCV感染或抑制HCV復制的方法，其中所述方法包括給予所述受試者有效量的肽或其變體、衍生物、突變體或片段，所述肽包含具有與氨基酸序列DEAQETAVSSHEQD具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些實施方案中，所述肽的氨基酸序列具有與氨基酸序列DEAQETAVSSHEQD具有至少75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％或更多同一性的氨基酸序列。在一些實施方案中，所述肽包含氨基酸序列DEAQETAVSSHEQD、QETAVSSHEQD或DEAQETAVSSHEQ。在一些實施方案中，所述肽的序列基本上由或由DEAQETAVSSHEQD、QETAVSSHEQD或DEAQETAVSSHEQ組成。在一些實施方案中，所述肽包含至少一個氨基酸添加、缺失和/或取代。在一些實施方案中，所述氨基酸添加、缺失和/或取代在C端和/或N端進行。在一些實施方案中，所述肽具有1-5、優選1-3個氨基酸添加、缺失和/或取代。在一些實施方案中，所述方法進一步包含給予另一種抗HCV劑。這種抗HCV劑可在本發明肽之前、之后或與之同時給予。在一些實施方案中，HCV具有基因型1a、1b、2a或2b或基因型3或基因型4。