[發明專利]多能干細胞的懸浮培養在審
| 申請號： | 201580076646.0 | 申請日： | 2015-12-09 |
| 公開（公告）號： | CN107250349A | 公開（公告）日： | 2017-10-13 |
| 發明（設計）人： | B.弗耶;D.拉尼奧斯卡斯 | 申請（專利權）人： | 詹森生物科技公司 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司72001 | 代理人： | 彭昶,黃希貴 |
| 地址： | 美國賓夕*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 多能 干細胞 懸浮 培養 | ||
1.一種用于分化人多能細胞的方法，包括以下步驟：通過在約7.2至約7.0的pH下在動態懸浮培養物中培養前腸內胚層細胞至少約24小時來使所述前腸內胚層細胞分化成胰腺內胚層細胞。
2.根據權利要求1所述的方法，還包括在具有等于或大于約150萬個細胞/mL的細胞濃度的培養物中培養所述前腸內胚層細胞。
3.根據權利要求1所述的方法，還包括在具有大于或等于約200萬個細胞/mL的細胞濃度的培養物中培養所述前腸內胚層細胞。
4.根據權利要求1所述的方法，其中所述胰腺內胚層細胞對于PTF1A和NGN3的表達基本上呈陰性。
5.根據權利要求4所述的方法，還包括將對于PTF1A和NGN3的所述表達基本上呈陰性的所述胰腺內胚層細胞富集成胰腺內胚層細胞群，所述胰腺內胚層細胞群具有大于或等于約96％的對于PDX1和NKX6.1的共表達呈陽性并且對于PTF1A的表達呈陽性的細胞。
6.根據權利要求4所述的方法，還包括在不存在其中產生對于PTF1A表達呈陽性的細胞的分化階段的情況下，將對于PTF1A和NGN3的所述表達基本上呈陰性的所述胰腺內胚層細胞分化成胰腺內分泌。
7.一種用于分化人多能細胞的方法，包括以下步驟：通過在約7.2至約7.0的pH下在動態懸浮培養物中培養前腸內胚層細胞至少約24小時，細胞濃度等于或大于約150萬個細胞/mL并且類視黃醇濃度為約0.5至約1.0μM，將所述前腸內胚層細胞分化成胰腺內胚層細胞，其中所述培養是在不存在能夠進行TGF-β信號轉導和BMP信號轉導的抑制、阻斷、激活或激動中的一者或多者的組分以及音猬因子信號轉導途徑抑制劑的情況下進行的。
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