[發明專利]葡糖淀粉酶共混物

有效

• 申請號: 201580076455.4
• 申請日: 2015-12-18
• 公開（公告）號: CN107429267B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: V·夏爾馬;P·J·M·特尼森
• 申請（專利權）人: 丹尼斯科美國公司
• 主分類號: C12P7/10
• 分類號: C12P7/10;C12P19/02;C12P19/14;C12G3/02;C12C11/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 柴云峰;黃革生

提供了用于糖化淀粉底物的方法，所述方法包括使該淀粉底物與葡糖淀粉酶接觸，該葡糖淀粉酶包括輪枝鐮孢菌葡糖淀粉酶(Fv?GA)的氨基酸序列或由其組成，并且進一步使該淀粉底物與至少一種另外的葡糖淀粉酶接觸。提供了使用Fv?GA和至少一種另外的葡糖淀粉酶的組合來糖化和發酵淀粉底物，以產生終產物、生物化學終產物和發酵飲料的另外的方法。

序列表

還附上包含SEQ ID NO:1-12的序列表并且將這些序列表以其全文通過引用結合在此。

技術領域

本披露總體上涉及葡糖淀粉酶(GA)，并且還描述了在與生產糖、糖漿、和生物化學品(包括乙醇)相關的工藝中使用這些GA(特別是在共混物中)的方法。

背景技術

工業發酵主要使用葡萄糖作為用于生產大量蛋白質、酶、醇和其他化學終產物的原料。典型地，葡萄糖是淀粉加工的產物，該淀粉加工常規是催化淀粉分解的兩步酶工藝，涉及液化和糖化。

在液化期間，將不溶性顆粒狀淀粉在水中成漿，進行加熱凝膠化，并通過熱穩定的α-淀粉酶進行水解。在糖化期間，在液化中產生的可溶性糊精被葡糖淀粉酶進一步水解，產生包含高于95％葡萄糖的高葡萄糖漿。

葡糖淀粉酶是外切作用糖酶，能夠水解淀粉(例如，直鏈淀粉和支鏈淀粉)的直鏈和支鏈糖苷鍵，從而自淀粉(例如，酶-液化淀粉底物)產生可發酵糖。這些可發酵糖，例如，低分子量的糖(如葡萄糖)然后可以通過其他酶(例如，葡萄糖異構酶)被轉化為果糖；進行結晶；或在發酵中使用以產生許多終產物(例如，醇、谷氨酸一鈉、琥珀酸、維生素、氨基酸、1,3-丙二醇、以及乳酸)。

鑒于葡糖淀粉酶在從淀粉產生葡萄糖中發揮的核心作用，在本領域中提供用于這一轉化的具有改進特性的葡糖淀粉酶(GA)的新共混物將是有利的。GA共混物的改進特性的實例包括但不限于：生產糖、糖漿、和生物化學品(包括但不限于乙醇)。

發明內容

提供了用于糖化淀粉底物的方法，所述方法包括使該淀粉底物與葡糖淀粉酶接觸，該葡糖淀粉酶包括輪枝鐮孢菌葡糖淀粉酶(Fv-GA)的氨基酸序列或由其組成，并且進一步使該淀粉底物與至少一種另外的葡糖淀粉酶接觸。提供了使用Fv-GA和至少一種另外的葡糖淀粉酶的組合來糖化和發酵淀粉底物，以產生終產物、生物化學終產物和發酵飲料的另外的方法。

本發明的實施例包括：

1.一種用于糖化淀粉底物的方法，該方法包括使該淀粉底物與葡糖淀粉酶接觸，該葡糖淀粉酶由Fv-GA(SEQ ID NO:1)的序列組成，該葡糖淀粉酶與Fv-GA(SEQ ID NO:1)的序列具有至少85％同一性，與Fv-GA(SEQ ID NO:1)的催化結構域具有至少85％同一性，與接頭和Fv-GA(SEQ ID NO:1)的催化結構域具有至少85％同一性，或與具有葡糖淀粉酶活性的Fv-GA(SEQ ID NO:1)的活性片段具有至少85％同一性，并且使該淀粉底物與至少一種另外的葡糖淀粉酶接觸。

在方法1的一些實施例中，第一個列出的葡糖淀粉酶與Fv-GA(SEQ ID NO:1)的序列具有90％、95％、98％、或99％同一性。

2.如1中所述的方法，其中該另外的葡糖淀粉酶包括Afu-GA(SEQ ID NO:3)或An-GA(SEQ ID NO:7)。

3.如1或2所述的方法，其中該另外的葡糖淀粉酶是Afu-GA(SEQ ID NO:3)或是與SEQ ID NO:3具有至少85％同一性的葡糖淀粉酶。

4.如1或2所述的方法，其中該另外的葡糖淀粉酶是An-GA(SEQ ID NO:7)或是與SEQ ID NO:7具有至少85％同一性的葡糖淀粉酶。

5.如1-4中任一項所述的方法，其中糖化該淀粉底物導致高葡萄糖漿。