[發明專利]用于利用免疫熒光的酶免疫測定的組合物及其用途

有效

• 申請號: 201580068163.6
• 申請日: 2015-10-16
• 公開（公告）號: CN107003303B
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: A·保羅希;A·薩內西;V·L·羅西;A·廷科;V·舒什尼
• 申請（專利權）人: 生物梅里埃公司
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/542
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 區斌

1.用于利用免疫熒光的酶免疫測定的組合物，其包含(i)熒光生成酶促底物，其在酶促水解之后形成熒光產物和第二反應產物，其中所述組合物還包含(ii)猝滅的熒光生成化合物，其在所述熒光生成酶促底物(i)酶促水解之后通過與所述第二反應產物反應形成熒光化合物。

2.權利要求1的組合物，其特征在于所述熒光生成酶促底物選自4-甲基傘形酮基磷酸酯(4-MUP)、4-甲基傘形酮基半乳糖苷(4-MUG)、4-甲基傘形酮基硫酸酯(4-MUS)、熒光素二磷酸酯(FDP)、6,8-二氟-4-甲基傘形酮基磷酸酯(DiFMUP)、9H-(1,3-二氯-9,9-二甲基吖啶-2-酮-7-基)磷酸酯(DDAO磷酸酯)、2′-[2-苯丙噻唑]-6′-羥基苯丙噻唑磷酸酯、2-萘基磷酸酯和2-傘形酮基磷酸酯。

3.權利要求2的組合物，其特征在于所述熒光生成酶促底物是4-甲基傘形酮基磷酸酯(4-MUP)。

4.前述權利要求中任一項的組合物，其特征在于所述猝滅的熒光生成化合物是猝滅的化學傳感器-陽離子復合物。

5.權利要求4的組合物，其特征在于所述猝滅的化學傳感器-陽離子復合物中的化學傳感器選自親水性香豆素和苯并咪唑衍生物，并且所述猝滅的化學傳感器-陽離子復合物中的陽離子選自Co²⁺、Cr³⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Hg²⁺和Pb²⁺。

6.權利要求5的組合物，其特征在于所述猝滅的化學傳感器-陽離子復合物選自：

-鈣黃綠素藍-Co²⁺復合物和

-N-[2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-苯基]-N-[(E)-1-(1H-吡咯-2-基)亞甲基]胺-Cu²⁺復合物。

7.權利要求4的組合物，其特征在于所述熒光生成酶促底物是4-甲基傘形酮基磷酸酯(4-MUP)，并且所述猝滅的化學傳感器-離子復合物是鈣黃綠素藍-Co²⁺復合物。

8.用于利用免疫熒光的酶免疫測定的試劑盒，其包含權利要求1-7中任一項的組合物。

9.用于免疫分析的自動化裝置，其包含權利要求1-7中任一項的組合物或權利要求8中的試劑盒。

10.前述權利要求中任一項的組合物、試劑盒或自動化裝置在利用分析物的免疫熒光的酶免疫測定中的用途。

11.通過利用可能包含分析物的液體測試樣品的免疫熒光的酶免疫測定體外檢測和/或定量所述分析物的方法，其包括以下步驟：

-使預先連接至或未連接至固體表面的捕獲配對物與所述液體樣品在一起以使所述分析物結合至所述捕獲配對物；

-添加檢測配對物以結合至所述捕獲配對物-分析物復合物，所述檢測配對物直接或間接偶聯至能夠裂解權利要求1-7中任一項的組合物中的所述熒光生成酶促底物的酶；

-使權利要求1-7中任一項的組合物和所述捕獲配對物-分析物-檢測配對物復合物在一起以形成反應介質；以及

-通過免疫熒光通過測量反應介質中發出的熒光檢測分析物的存在和/或量。

12.權利要求11的體外檢測和/或定量分析物的方法，其包括至少一個以下步驟：

在添加所述檢測配對物之前的漂洗步驟以便消除未結合至所述捕獲配對物-分析物復合物的分析物；以及

在添加所述檢測配對物之后的漂洗步驟以便消除所述未結合的檢測配對物。