[發明專利]腺苷脫氨酶-2(ADA2)、其變體的組合物及使用其的方法

在審

• 申請號: 201580067535.3
• 申請日: 2015-10-14
• 公開（公告）號: CN108064282A
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: C·D·薩諾斯;L·王;M·H·謝潑德
• 申請（專利權）人: 哈洛齊梅公司
• 主分類號: C12N9/78
• 分類號: C12N9/78;C12N9/10;C12N5/10;C12N15/09;A61K38/46;A61K45/00;A61K38/00;A61P35/00;A61P9/00;A61K38/48;A61P31/00;A61P43/00;A61P37/04;A61P19/04
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健;林曉紅

1.一種變體腺苷脫氨酶2(ADA2)蛋白或者其催化活性部分，其在未修飾的ADA2多肽或其催化活性部分的氨基酸序列中包含一或多個修飾，其中：

所述未修飾的ADA2蛋白包含SEQ ID NO:5所示氨基酸序列，或者與SEQ ID NO:5所示氨基酸序列呈現至少85％序列相同性的氨基酸序列，或者是其催化活性部分；

所述氨基酸修飾選自氨基酸置換、缺失和插入；

當是二聚體形式時，所述變體ADA2蛋白與SEQ ID NO:5的未修飾的ADA2蛋白的相應二聚體形式或者其相應的催化活性部分的二聚體形式相比，呈現選自如下的一或多種性質：增加的腺苷脫氨酶活性、降低的肝素結合、更長的血清半衰期、改變的pH最佳值、增加的熱穩定性、改變的受體結合和高糖基化；及

當是二聚體形式時，所述變體ADA2蛋白呈現腺苷脫氨酶活性以將腺苷轉變為肌苷。

2.權利要求1的變體ADA2蛋白或其催化活性部分，當是二聚體形式時，其呈現增加的腺苷脫氨酶活性及降低的肝素結合。

3.權利要求1或2的變體ADA2蛋白或其催化活性部分，其中所述未修飾的ADA2蛋白是同源二聚體，且單體形式包含SEQ ID NO:5所示氨基酸殘基序列。

4.權利要求1或2的變體ADA2蛋白的催化活性部分，其中所述未修飾的ADA2蛋白是序列由SEQ ID NO:5示出的多肽的相應催化活性部分的同源二聚體，其中相應部分通過比對確定。

5.權利要求1-4任一項的變體ADA2蛋白或其催化活性部分，其中ADA2蛋白不包含選自如下氨基酸置換的修飾：相應于H7R、G18A、G18R、G18V、I64T、A80D、H83Q、V90A、C108G、A120V、H121R、W133G、R125C、R140Q、K141R、R142W、P164L、P222L、W235S、H306R、E330G、W333G、V365L、Y424C、F464S的氨基酸置換，或者相應于R8-K14del→--的缺失，編號參照SEQID NO:5所示氨基酸殘基。

6.權利要求1-5任一項的變體ADA2蛋白或其催化活性部分，其中所述未修飾的ADA2蛋白包含與SEQ ID NO:5所示氨基酸序列或其相應催化活性部分呈現至少86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列相同性的氨基酸序列。

7.權利要求1-6任一項的變體ADA2蛋白或其催化活性部分，其中所述未修飾的ADA2蛋白與SEQ ID NO:5所示氨基酸序列或者與其相應催化活性部分具有至少95％序列相同性。

8.權利要求1-7任一項的變體ADA2蛋白，其中所述未修飾的ADA2蛋白包含SEQ ID NO:5、326-334、340、375和380-383任一所示氨基酸序列或者是其催化活性部分。

9.權利要求1-7任一項的變體ADA2蛋白，其中所述未修飾的ADA2蛋白由SEQ ID NO:5、326-334、340、375和380-383任一所示氨基酸序列組成或者是其催化活性部分。

10.權利要求1-7任一項的變體ADA2蛋白，其中所述未修飾的ADA2蛋白包含SEQ ID NO:5所示氨基酸序列或者其催化活性部分。

11.權利要求1-10任一項的變體ADA2蛋白，其中所述未修飾的ADA2蛋白的催化結構域具有SEQ ID NO:5所示蛋白的殘基77-473所示的序列。