[發明專利]用于鑒別對雄激素受體靶向療法的抵抗性的循環腫瘤細胞診斷

有效

• 申請號: 201580064039.2
• 申請日: 2015-09-24
• 公開（公告）號: CN107250796B
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 瑞安·迪塔莫爾
• 申請（專利權）人: 艾匹克科學公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/53;C12Q1/6886;G01N21/64
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 鄭霞

1.廣譜細胞角蛋白、分化簇(CD)45、二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和AR在制備用于預測對于前列腺癌患者腫瘤中雄激素受體(AR)靶向療法新生抵抗性的免疫熒光染色試劑中的用途，其中

(a)用所述免疫熒光染色試劑實施包括獲自患者的血液樣品中有核細胞的免疫熒光染色和形態學表征的直接分析以產生循環腫瘤細胞(CTC)數據，其中所述分析包括確定一組對于雄激素受體(AR)靶向療法的新生抵抗性的常規和非常規CTC生物標志物的可測量特征，其中，所述生物標志物包括(1)CTC異質性，(2)具有明顯核仁形態的細胞角蛋白陽性(CK+)，AR N-末端陽性CTC的頻率，和(3)AR C-末端截短CTC的頻率，所述CTC異質性包括選自下列的生物標志物：常規CTC、CTC簇、CK-CTC、小CTC、核仁⁺CTC、CK斑點型CTC和表1中所列的生物標志物，

(b)評價所述CTC數據以確定對于前列腺癌患者腫瘤中AR靶向療法的新生抵抗性的概率，

其中，與對AR靶向療法起反應的患者相比，(1)更大的CTC異質性；(2)具有明顯核仁形態的CK+，AR N-末端陽性CTC的頻率更高；或(3)AR C-末端截短的CTC的頻率更高預測對AR靶向療法新生抵抗性，以及

其中所述前列腺癌是轉移性去勢抵抗性前列腺癌(mCRPC)。

2.根據權利要求1所述的用途，其中，所述免疫熒光染色包括有核細胞的免疫熒光染色。

3.根據權利要求1-2中任一項所述的用途，包括將所述有核細胞作為單層沉積到載玻片上的初始步驟。

4.根據權利要求1-2中任一項所述的用途，其中，所述CTC數據是通過熒光掃描顯微術產生的。

5.根據權利要求3所述的用途，其中，所述CTC數據是通過熒光掃描顯微術產生的。

6.根據權利要求4所述的用途，其中，所述顯微術提供了包含CTC和至少200個周圍白細胞(WBC)的視場。

7.根據權利要求5所述的用途，其中，所述顯微術提供了包含CTC和至少200個周圍白細胞(WBC)的視場。

8.根據權利要求1-2或5-7中任一項所述的用途，其中，所述CTC數據是通過評價至少400萬個所述有核細胞產生的。

9.根據權利要求3所述的用途，其中，所述CTC數據是通過評價至少400萬個所述有核細胞產生的。

10.根據權利要求4所述的用途，其中，所述CTC數據是通過評價至少400萬個所述有核細胞產生的。

11.根據權利要求6所述的用途，其中，所述CTC包括不同于周圍有核細胞的免疫熒光染色。

12.根據權利要求7所述的用途，其中，所述CTC包括不同于周圍有核細胞的免疫熒光染色。

13.根據權利要求6所述的用途，其中，所述CTC包括與周圍有核細胞相比不同的形態特征。

14.根據權利要求7所述的用途，其中，所述CTC包括與周圍有核細胞相比不同的形態特征。

15.根據權利要求13所述的用途，其中，所述形態特征包括以下中的一種或多種：核大小、核形狀、核中孔的存在、細胞大小、細胞形狀和核漿比、核細節、核輪廓、存在或不存在核、胞漿的質量以及胞漿的量。

16.根據權利要求14所述的用途，其中，所述形態特征包括以下中的一種或多種：核大小、核形狀、核中孔的存在、細胞大小、細胞形狀和核漿比、核細節、核輪廓、存在或不存在核、胞漿的質量以及胞漿的量。