[發明專利]精氨酸提高聚合酶儲存穩定性

在審

• 申請號: 201580063950.1
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN107002063A
• 公開（公告）日: 2017-08-01
• 發明（設計）人: 鄭旻
• 申請（專利權）人: 生物輻射實驗室股份有限公司
• 主分類號: C12N9/96
• 分類號: C12N9/96
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司31100
• 代理人: 陳揚揚,陶啟長

1.一種用于聚合酶的液體儲存溶液，所述溶液包含，

所述聚合酶；

游離精氨酸，或其鹽，或精氨酸衍生物或其鹽，和

5％或更多的冷凍保護劑。

2.如權利要求1所述的液體溶液，其中所述冷凍保護劑是二醇、三醇、多元醇、一元醇或亞砜。

3.如權利要求1所述的液體溶液，其中所述游離精氨酸或其鹽或精氨酸衍生物或其鹽的濃度是0.01-2.5M。

4.如權利要求1所述的液體溶液，其還包含緩沖劑、KCl、乙二胺四乙酸(EDTA)或二硫蘇糖醇(DTT)中的一種或多種。

5.如權利要求4所述的液體溶液，其中所述液體溶液包含緩沖劑并且所述緩沖劑是Goods緩沖劑。

6.如權利要求5所述的方法，其中所述Goods緩沖劑選自下組：MES、BIS-TRIS、ADA、ACES、PIPES、Bis-6Tris丙烷、MOPSO、BES、MOPS、TES、HEPES、DIPSO、MPOS、TAPSO、HEPPSO、POPSO、EPPS、N-三(羥甲基)甲基甘氨酸、TRIS、AMP、重碳酸鹽、N-二(羥乙基)甘氨酸、硼酸鹽、卡可酸鹽、CAPS、CAPSO、CHES、檸檬酸鹽、DIPSO、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸、磷酸鹽、TAPS、TAPSO和TEA。

7.如權利要求1所述的液體溶液，其中所述精氨酸或其鹽的濃度是0.1-1.0M。

8.如權利要求1-7中任一種所述的液體溶液，其中所述溶液缺乏足以維持模板多核苷酸的聚合的組分。

9.如權利要求8所述的液體溶液，其中所述溶液缺乏以下至少一種：

模板多核苷酸；或

寡核苷酸引物。

10.如權利要求1所述的液體溶液，其中所述溶液溫度是-80℃到5℃。

11.如權利要求1所述的液體溶液，其中所述溶液溫度是-30℃到5℃。

12.如前述權利要求中任一項所述的液體溶液，其中所述溶液不含洗滌劑。

13.如前述權利要求中任一項所述的液體溶液，其中所述溶液包含一種或多種洗滌劑。

14.如前述權利要求中任一項所述的液體溶液，其中所述溶液不含三糖。

15.如前述權利要求中任一項所述的液體溶液，其中所述聚合酶是熱穩定聚合酶。

16.如前述權利要求中任一項所述的液體溶液，其中所述聚合酶是反轉錄酶。

17.如前述權利要求中任一項所述的液體溶液，其中所述聚合酶是B家族聚合酶。

18.一種保持儲存期間的聚合酶的穩定性的方法，該方法包括，

提供如權利要求1-17中任一項所述的液體溶液；和

在-80℃和5℃之間儲存所述溶液至少3(例如至少7、14、21、28、50、100)天。

19.如權利要求18所述的方法，其中所述儲存在-80℃和5℃之間。

20.如權利要求18所述的方法，其中所述儲存在-80℃和90℃之間。

21.如權利要求18所述的方法，其還包括，儲存后在酶促反應中使用所述聚合酶。

22.一種保持儲存期間的聚合酶的穩定性的方法，所述方法包括，

提供包含所述聚合酶和0.01-5.0M精氨酸或其鹽的液體溶液；和

儲存所述溶液至少3(例如至少7、14、21、28、50、100)天。

23.如權利要求22所述的方法，其中所述儲存在-80℃和5℃之間。

24.如權利要求22所述的方法，其中所述儲存在-80℃和90℃之間。

25.如權利要求22所述的方法，其還包括，儲存后在酶促反應中使用所述聚合酶。