[發明專利]閉塞性動脈病的診斷

在審

• 申請號: 201580063405.2
• 申請日: 2015-11-26
• 公開（公告）號: CN107250800A
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發明（設計）人: 吉恩·拉夫;瑞吉斯·歸尤;弗蘭克·帕加內利;勞倫特·博內洛;喬瓦那·莫托拉;娜塔麗·克普森
• 申請（專利權）人: 艾克斯-馬賽大學;馬賽公立援助醫院;國立健康與醫學研究所
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/68;G01N33/577;C07K16/28;C12N5/20
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司11270
• 代理人: 景鵬,姚開麗

1.一種診斷或預測個體中的閉塞性動脈病的體外方法，其特征在于，所述體外方法包括以下步驟：

a)確定在獲自所述個體的外周血單核細胞(PBMC)的細胞表面上表達的腺苷A_2A受體(A_2AR)的表達水平，以及

b)將步驟a)中確定的表達水平與在先前獲自所述個體的PBMC細胞表面上表達的A_2AR的表達水平，或與在PBMC細胞表面上表達的A_2AR的標準表達水平進行比較，

低于先前獲自所述個體的表達的A_2AR的表達水平，或者低于所述A_2AR的標準表達水平的在步驟a)中確定的表達水平，構成閉塞性動脈病或易患閉塞性動脈病的標記物。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述閉塞性動脈病選自由冠狀動脈疾病和外周閉塞性動脈病組成的組，優選為冠狀動脈疾病。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述PBMC獲自從所述個體的肱靜脈收集的血液樣品。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其特征在于，通過蛋白質印跡法或流式細胞術測定來確定A_2AR的表達水平。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其特征在于，所述方法進一步包括確定在獲自所述個體的PBMC上是否存在儲備腺苷A_2A受體(儲備A_2AR)的步驟，儲備A_2AR的存在構成閉塞性動脈病變或易患閉塞性動脈病變的另一標記物。

6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于，使用保藏于CNCM，保藏編號為I-4908的雜交瘤產生的激動劑樣單克隆抗體，確定A_2AR的表達水平和/或儲備A_2AR的存在。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其特征在于，所述方法進一步包括由血液樣品確定運動壓力測試(EST)期間，所述個體中的腺苷血漿濃度(APC)變化的步驟，APC在EST期間的增加構成閉塞性動脈病變或易患閉塞性動脈病變的另一標記物。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述運動壓力測試是平板運動測試。

9.一種產生抗人腺苷A_2A受體的激動劑樣單克隆抗體的雜交瘤，所述雜交瘤于2014年11月7日保藏于CNCM，保藏編號為I-4908。

10.一種由權利要求9所述的雜交瘤產生的抗人腺苷A_2A受體的激動劑樣單克隆抗體或其片段。

11.一種權利要求10所述的抗體的分離片段，所述分離片段包括所述激動劑樣單克隆抗體的三個CDR并且能結合A_2AR。

12.一種多肽，所述多肽包括權利要求10所述的抗體的一個、兩個或三個CDR并且能結合A_2AR。

13.抗人腺苷A_2A受體的激動劑樣單克隆抗體或權利要求11所述的分離片段或權利要求12所述的多肽在體外診斷或預測個體中的閉塞性動脈病的用途，其中，所述分離片段和所述多肽能結合A_2AR。

14.根據權利要求13所述的用途，其特征在于，所述抗人腺苷A_2A受體的激動劑樣單克隆抗體是權利要求10所述的抗體。

15.一種用于體外診斷或預測個體中的冠狀動脈疾病或外周閉塞性動脈病的試劑盒，所述試劑盒包括：

抗人腺苷A_2A受體的激動劑樣單克隆抗體或權利要求11所述的分離片段或權利要求12所述的多肽，其中，所述抗體、所述分離片段和所述多肽能結合A_2AR，

至少一種陽性對照，所述至少一種陽性對照由患有冠狀動脈疾病或外周閉塞性動脈病的個體的PBMC裂解物組成，以及

至少一種陰性對照，所述至少一種陰性對照由健康個體的PBMC裂解物組成。