[發明專利]用于制備細胞結合劑?細胞毒性劑綴合物的方法

在審

• 申請號: 201580060700.2
• 申請日: 2015-11-18
• 公開（公告）號: CN107592813A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: B·M·哈欽斯
• 申請（專利權）人: 伊繆諾金公司
• 主分類號: A61K47/50
• 分類號: A61K47/50;A61K47/68;A61K31/5365;A61P35/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所11256
• 代理人: 陳文平,侯寶光

1.一種用于制備細胞結合劑細胞毒性劑綴合物的方法，所述方法包括以下步驟：

(a)使細胞毒性劑與由以下結構式表示的雙功能交聯試劑：

或其鹽在包含緩沖劑的緩沖溶液中反應，以提供包含細胞毒性劑-接頭化合物的第一混合物，其中所述緩沖溶液具有高緩沖能力；

(b)使從步驟(a)獲得的所述第一混合物中的所述細胞毒性劑-接頭化合物與細胞結合劑在pH為4至9的溶液中反應，以提供包含所述細胞結合劑細胞毒性劑綴合物的第二混合物。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞結合劑易于片段化。

3.如權利要求1或2所述的方法，其中所述細胞毒性劑是美登木素生物堿。

4.如權利要求3所述的方法，其中所述細胞毒性劑是DM4。

5.如權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述緩沖劑與所述雙功能交聯試劑的摩爾比是1.5:1至12.5:1。

6.如權利要求5所述的方法，其中所述緩沖劑與所述雙功能交聯試劑的所述摩爾比是2:1至8:1。

7.如權利要求5所述的方法，其中所述緩沖劑與所述雙功能交聯試劑的所述摩爾比是4:1至6:1。

8.如權利要求5所述的方法，其中所述緩沖劑與所述雙功能交聯試劑的所述摩爾比是5:1。

9.如權利要求1-8中任一項所述的方法，其中所述緩沖溶液具有4至9的pH。

10.如權利要求9所述的方法，其中所述緩沖溶液具有7.5至8.5的pH。

11.如權利要求10所述的方法，其中所述緩沖溶液具有7.9至8.5、8.0至8.4或8.1至8.3的pH。

12.如權利要求9所述的方法，其中所述緩沖溶液具有8.2的pH。

13.如權利要求1-12中任一項所述的方法，其中所述緩沖劑選自由以下組成的組：檸檬酸鹽緩沖劑、乙酸鹽緩沖劑、琥珀酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖劑。

14.如權利要求1-12中任一項所述的方法，其中所述緩沖劑選自由以下組成的組：HEPPSO(N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-(2-羥基丙磺酸))、POPSO(哌嗪-1,4-雙-(2-羥基-丙烷-磺酸)脫水物)、HEPES(4-(2-羥乙基)哌嗪-1-乙磺酸)、EPPS(4-(2-羥乙基)哌嗪-1-丙磺酸)、TES(N-[三(羥甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸)、MES(2-(N-嗎啉代)乙磺酸)及其組合。

15.如權利要求14所述的方法，其中所述緩沖劑是EPPS。

16.如權利要求1-15中任一項所述的方法，其中所述緩沖溶液還包含氯化鈉。

17.如權利要求1-16中任一項所述的方法，其中所述緩沖溶液還包含有機溶劑。

18.如權利要求17所述的方法，其中所述有機溶劑是DMA。

19.如權利要求17或18所述的方法，其中所述有機溶劑以所述緩沖溶液的1體積％-99體積％、50體積％-99體積％、60體積％-99體積％或70體積％-99體積％的量存在。

20.如權利要求19所述的方法，其中所述有機溶劑以所述緩沖溶液的50體積％-90體積％、55體積％-85體積％、60體積％-80體積％或65體積％-75體積％的量存在。

21.如權利要求19所述的方法，其中所述有機溶劑以所述緩沖溶液的70體積％的量存在。

22.如權利要求1-21中任一項所述的方法，其中在步驟(a)的所述反應中使用相對于所述雙功能交聯試劑摩爾過量的量的所述細胞毒性劑。

23.如權利要求22所述的方法，其中所述細胞毒性劑與所述雙功能交聯試劑的摩爾比是1.1:1至20:1、1.1:1至10:1、1.1:1至5:1或1.1:1至2:1。

24.如權利要求23所述的方法，其中所述細胞毒性劑與所述雙功能交聯試劑的所述摩爾比是1:1:1至1.3:1。