[發(fā)明專利]用于去除可浸出物和/或可提取物的活性炭

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580060422.0
• 申請(qǐng)日: 2015-10-20
• 公開（公告）號(hào): CN107635657B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: R.施庫(kù)達(dá)斯;K.阿德里安;B.埃德爾曼;S.安德雷赫特;W.莫亞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 默克專利股份公司
• 主分類號(hào): B01J20/20
• 分類號(hào): B01J20/20;B01D39/20;C07K1/22;B01D15/08
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 林毅斌;周齊宏

本發(fā)明涉及純化靶分子，如重組和/或生物治療蛋白。可用活性炭去除由過(guò)程中所用可棄式設(shè)備產(chǎn)生的可浸出物和/或可提取物。

本發(fā)明涉及純化靶分子，如重組和/或生物治療蛋白，例如，由細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)產(chǎn)生。可用活性炭去除由過(guò)程中所用可棄式設(shè)備產(chǎn)生的可浸出物和/或可提取物。

發(fā)明背景

有效和經(jīng)濟(jì)地大規(guī)模制備生物分子是生物技術(shù)和制藥工業(yè)上越來(lái)越重要的考慮，例如，治療蛋白，包括抗體、肽或激素。一般純化過(guò)程很復(fù)雜，花費(fèi)大，且包括很多不同步驟。

一般蛋白用細(xì)胞培養(yǎng)方法制備，例如，使用哺乳動(dòng)物或細(xì)菌細(xì)胞系，經(jīng)重組工程以制備關(guān)注蛋白。通常，在靶蛋白表達(dá)后，從一種或多種雜質(zhì)(例如，宿主細(xì)胞蛋白、培養(yǎng)基組分和核酸)分離造成難以克服的挑戰(zhàn)。如果治療蛋白要用于人，且必須由管理機(jī)構(gòu)例如美國(guó)食品藥物管理局(FDA) 批準(zhǔn)，則這種分離和純化尤其重要。

現(xiàn)今用于純化蛋白的常規(guī)方法通常至少包括以下步驟：(a)用于去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片的澄清步驟，例如，使用差分離心和/或過(guò)濾；和(b)從澄清細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)料中的不同雜質(zhì)分離關(guān)注蛋白的一個(gè)或多個(gè)下游色譜步驟。

因此，制備和純化生物分子是涉及數(shù)個(gè)類型純化介質(zhì)和數(shù)個(gè)類型設(shè)備的多步過(guò)程。

出于靈活、安全、減少的資本和操作費(fèi)用的生產(chǎn)，在生物制藥工業(yè)有一個(gè)新出現(xiàn)趨勢(shì)是將一次使用和/或可棄式塑料材料。可棄式生物處理設(shè)備可在寬范圍和規(guī)模使用，從溶液容器、輸送管到各種裝置。在制備過(guò)程期間，這些設(shè)備組件與產(chǎn)物直接接觸。已發(fā)現(xiàn)，來(lái)自塑料材料的可浸出物和/或可提取物可最終存在于成品中(W. Ding, Chemie IngenieurTechnik 2013, 85, No 1-2, 186-196)。雖然可浸出物/可提取物的水平通常低于工業(yè)指導(dǎo)(Q3C)中所給的水平，但問(wèn)題是，即使低水平可浸出物/可提取物也可能影響藥品安全性，并影響性能，導(dǎo)致產(chǎn)品安全和質(zhì)量問(wèn)題。

因此，需要在生物過(guò)程中從靶生物分子去除可浸出物/可提取物，以保證藥品安全性和質(zhì)量，同時(shí)使用可棄式設(shè)備。

發(fā)明概述

已發(fā)現(xiàn)，可通過(guò)經(jīng)活性炭裝置過(guò)濾去除或減少在靶分子制備中由使用可棄式設(shè)備產(chǎn)生的可浸出物/可提取物的量。

因此，本發(fā)明涉及純化靶分子的方法，其制備和/或純化過(guò)程包括使用可棄式設(shè)備，其中用活性炭使靶分子與可浸出物和/或可提取物分離。一般通過(guò)使活性炭與包含靶分子和潛在可浸出物和/或可提取物的液體接觸，進(jìn)行純化，其中可浸出物和/或可提取物在與活性炭接觸時(shí)保持或結(jié)合到活性炭上，而包含靶分子的液體不結(jié)合，然后例如通過(guò)過(guò)濾從活性炭分離。

在一個(gè)實(shí)施方案中，靶分子為具有10000或更大分子量的蛋白。

在一個(gè)實(shí)施方案中，靶分子為糖蛋白。

在一個(gè)實(shí)施方案中，靶分子為抗體。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，可浸出物和/或可提取物為一種或多種以下組分：乙醛、甲苯、2-己酮、丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯、雙酚A、芐醇、三甲基硅烷醇、甲醛、苯二甲酸雙(2-乙基己基)酯、乙酸1-甲基乙酯、2,4-二叔丁基苯酚、2-辛酮、2-戊酮、3,3-二甲基-2-丁酮、3-乙氧基丙烷、3-己酮、3-甲氧基-1-丁醇、丁醛、環(huán)己酮、乙醇、甲酸、七乙二醇、己醛、甲基·異丁基酮、戊醛、叔丁醇、四氫呋喃、甲酸甲酯。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，方法在3至9之間的pH進(jìn)行。

在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，活性炭為通過(guò)有機(jī)聚合材料、優(yōu)選聚苯乙烯熱解得到的活性炭。

在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，活性炭具有5和40μm之間的中值粒徑。

在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)經(jīng)一個(gè)或多個(gè)包含活性炭的濾器過(guò)濾使靶分子與可浸出物和/或可提取物分離。