[發明專利]確定溶劑校正曲線的方法有效

申請號：	201580059042.5	申請日：	2015-10-26
公開（公告）號：	CN107110842B	公開（公告）日：	2020-04-10
發明（設計）人：	O.卡爾斯森;H.伯林克	申請（專利權）人：	通用電氣健康護理生物科學股份公司
主分類號：	G01N33/483	分類號：	G01N33/483;G01N33/53;G01N33/543
代理公司：	中國專利代理(香港)有限公司 72001	代理人：	徐晶;周李軍
地址：	瑞典烏***	國省代碼：	暫無信息
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摘要：
搜索關鍵詞：	確定溶劑校正曲線方法
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【說明書】：

發明領域

本發明涉及用于調節有效(active)和參考檢測表面之間的主體信號失配的方法。更具體地說，本發明涉及用于建立溶劑校正曲線以及使用所述曲線從分析物的傳感圖獲得校正的傳感圖或校正的報告點的方法。本發明還涉及用于執行所述方法的步驟的分析系統和計算機程序產品。

發明背景

能夠實時監測分子相互作用的分析傳感器系統(即，無標簽系統)正受到越來越多的關注。這些系統經常基于光學生物傳感器，且通常被稱作相互作用分析傳感器或生物特異性相互作用分析傳感器。代表性生物傳感器系統是由GE Healthcare Life Sciences銷售的Biacore?儀器，其使用表面等離子體共振(surface plasmon resonance，SPR)來檢測樣品中的分子與固定在傳感表面上的分子結構之間的相互作用。使用Biacore?系統，有可能在不使用標記的情況下實時確定樣品中的具體分子的存在和濃度以及附加的相互作用參數，例如分子相互作用的締合速率常數和解離速率常數。該裝置和理論背景在文獻(參見例如，Jonsson，U.等人，BioTechniques 11：620-627(1991))中充分描述。通常，該技術涉及將配體固定到傳感器芯片(流動池)的特殊光學傳感器表面，使傳感器芯片與含有感興趣的分析物的樣品流接觸，和隨后測量由配體和分析物之間的結合引起的傳感器芯片的表面光學特性中的變化。有關SPR的更多細節，還參考美國專利No. 5,313,264、美國專利No. 5,573,956和美國專利No. 5,641,640。

當用弱疏水的分析物分子運行測定時，可能需要在流動緩沖液和樣品中包含有機溶劑。對于較小的有機分子分析物(80-1000Da)，通常使用有機溶劑例如2-5%二甲基亞砜(DMSO)。許多這些應用取決于有效表面和參考表面之間的基準減法(reference subtraction)，以便獲得足夠的數據品質。然而，取決于固定在有效表面上的配體的量，主體信號(來自流動緩沖液和樣品中的折射率的差異)不能被基準減法完全猝滅。這被添加到來自分析物結合的響應中，并且由于失配也隨著移液誤差而變化，其可以從顯著的正值跨到負值。取決于報告點讀數，這可能對測定中的數據品質而言是重要的。

然而，這可以通過測量在參考物中參考誤差與主體響應的函數且隨后通過該函數調節每個樣品來校正，即溶劑校正。當進行溶劑校正時，用戶必須制備具有代表性主體響應的許多溶液(根據Biacore推薦的程序，8種)。為了建立校正曲線，將這些溶液注射到每一對參考-有效檢測表面上。由于程序在整個運行中重復至少一次，并且由于不存在多次使用相同位置的方式，板占用率和用戶工作量是顯著的。

需要使溶劑校正過程簡單和自動化。

發明概述

本發明涉及用于建立溶劑校正曲線以及使用所述曲線從分析物的傳感圖獲得校正傳感圖或校正報告點的方法。

在一方面，它提供了用于建立溶劑校正曲線的方法，其包括：

a. 提供包含高濃度的有機溶劑的第一溶液和包含低濃度的相同有機溶劑的第二溶液；

b. 在集成微流體盒(IFC)的流動通道中以預定比例在線混合所述兩種溶液，所述流動通道包含具有未固定有配體或類似物的光學傳感器表面的流動池；

c. 從步驟(b)的光學傳感器表面獲得所述混合溶液的傳感圖，所述傳感圖包含所述傳感圖的穩定部分處的報告點；

d. 在集成微流體盒(IFC)的另一個流動通道中以如步驟(b)中的相同預定比例在線混合所述兩種溶液，所述流動通道包含具有固定有配體或類似物的光學傳感器表面的流動池；

e. 從步驟(d)的光學傳感器表面獲得所述混合溶液的傳感圖，所述傳感圖包含所述傳感圖的穩定部分處的報告點；

f. 以所述兩種溶液的不同預定比例重復步驟(b)和(c)各n次；和

g. 使用所述報告點建立溶劑校正曲線；

其中n為至少3。