[發明專利]高溫種子萌發

有效

• 申請號: 201580057920.X
• 申請日: 2015-09-15
• 公開（公告）號: CN107404857B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: E·R·科普爾斯;M·波斯特
• 申請（專利權）人: 瑞克斯旺種苗集團公司
• 主分類號: A01H5/10
• 分類號: A01H5/10;C12N15/61;C12N15/11
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

1.生產具有經修飾的NXS基因的萵苣(Lactuca?sativa)種子的方法，其中所述經修飾的NXS基因包含導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置140上的提前終止密碼子的SNP，或者其中所述經修飾的NXS基因包含導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置212上的脯氨酸置換成絲氨酸的SNP，或者其中用導致非保守氨基酸改變的任何其他氨基酸置換在編碼SEQ?ID?No.2的NXS蛋白的位置175上的色氨酸殘基，當在萵苣種子中純合存在時，所述經修飾的NXS基因為該種子提供在高溫下萌發的能力，所述方法包括從具有經修飾的NXS基因的萵苣種子生長萵苣植物，允許植物產生種子并收獲那些種子。

2.權利要求1的方法，其中NXS基因的表達被顯著降低或被阻止。

3.權利要求1的方法，其中與不具有經修飾的NXS基因的野生型種子相比，該種子具有降低的NXS蛋白水平、降低的NXS蛋白活性或完全不存在NXS蛋白。

4.權利要求1的方法，其中提前終止密碼子是SEQ?ID?No.1的位置3018上的GA?SNP的結果。

5.權利要求1的方法，其中導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置212上的脯氨酸置換成絲氨酸的SNP是SEQ?ID?No.1的位置3518上的CT?SNP。

6.權利要求1至5中任一項的方法，其中種子屬于種子批次，并且所述種子包含如權利要求1至5中任一項所定義的經修飾的NXS基因，當經修飾的NXS基因純合存在于萵苣種子中時，經修飾的NXS基因給未引發狀態的種子提供在高溫下萌發的能力，并且所述種子批次的特征在于所述種子批次的GT50?Dark比不包含經修飾的NXS基因的種子的種子批次的GT50Dark高至少10℃。

7.權利要求6的方法，其中包含經修飾的NXS基因的種子的種子批次的GT50?Dark比不包含經修飾的NXS基因的種子的種子批次的GT50?Dark高10℃至25℃。

8.權利要求6的方法，其中包含經修飾的NXS基因的種子的GT50Dark為至少31.8℃。

9.權利要求6的方法，其中包含經修飾的NXS基因的種子的種子批次的GT50?Dark為28℃至40℃。

10.生產能夠在高溫下萌發的萵苣種子的方法，包括修飾種子的NXS基因以降低基因的表達水平、以阻止基因的表達和/或降低編碼的NXS蛋白的活性，其中修飾NXS基因包括引入導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置140上的提前終止密碼子的SNP，或者引入導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置212上的脯氨酸置換成絲氨酸的SNP，或者用導致非保守氨基酸改變的任何其他氨基酸置換在編碼SEQ?ID?No.2的NXS蛋白的位置175上的色氨酸殘基。

11.生產具有如權利要求1至5中任一項所定義的經修飾的NXS基因的萵苣植物的方法，其中當在萵苣種子中純合存在時，所述經修飾的NXS基因為種子提供在高溫下萌發的能力，所述方法通過使用二倍體化單倍體生成技術以產生包含高溫萌發性狀的二倍體化單倍體系。

12.生產雜交萵苣種子的方法，包括將第一親本萵苣植物與第二親本萵苣植物雜交并收獲所得雜交種子，其中所述第一親本植物和所述第二親本植物是攜帶如權利要求1至5中任一項所定義的經修飾的NXS基因的至少一個等位基因的植物，其中所述經修飾的NXS基因包含導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置140上的提前終止密碼子的SNP，或者其中所述經修飾的NXS基因包含導致在編碼根據SEQ?ID?No.2的蛋白質的位置212上的脯氨酸置換成絲氨酸的SNP，或者其中用導致非保守氨基酸改變的任何其他氨基酸置換在編碼SEQID?No.2的NXS蛋白的位置175上的色氨酸殘基。