[發明專利]miR-29模擬物及其用途

有效

• 申請號: 201580057333.0
• 申請日: 2015-09-08
• 公開（公告）號: CN107108685B
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: R.L.蒙哥馬利;C.多爾比;E.范羅伊;C.加蘭特-貝姆
• 申請（專利權）人: 米拉根醫療股份有限公司
• 主分類號: C07H21/02
• 分類號: C07H21/02
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝;易方方

本發明涉及miRNA的合成寡核苷酸模擬物。特別地，本發明提供了miR?29的雙鏈、化學修飾的寡核苷酸模擬物。還描述了包含所述模擬物的藥物組合物及其在治療或預防與細胞外基質基因調節異常相關的狀況，如組織纖維化狀況。

相關申請的交叉引用

本申請要求2014年9月8日提交的，美國臨時申請號62/047,562的優先權，其全部內容通過引用在此并入本申請。

發明領域

本發明涉及在體內增加miRNA活性的合成的miRNA模擬物或前miR。特別地，本發明涉及miR-29的模擬物及其在減少膠原沉積和相關狀況(如纖維化)中的用途。

發明背景

基于在使用微RNA(miRNA)的遺傳或藥理調節的動物疾病模型中收集的功能獲得或功能喪失的數據，miRNA是疾病過程中的重要參與者現已被廣泛接受。這些研究結合陽性的臨床療效數據(Janssen等，2013)強調了miRNA的相關性以及miRNA成為下一類治療的可行性。事實上，miRNA作為治療干預點具有若干優點，因為其很小并包括已知序列。此外，由于單個miRNA能夠調節生物學途徑中的很多靶mRNA，因而原則上調節miRNA可以影響整個基因網絡并且改善復雜的疾病表型(van RooijOlson,2012)。

盡管很多研究已顯示出使用稱為抗miR的單鏈miRNA抑制劑的治療作用，但是恢復或增加miRNA功能的努力一直滯后(van Rooij et al,2012)。目前，可以通過病毒過表達或通過使用合成的雙鏈miRNA增加miRNA的功能。到目前為止，腺相關病毒(AAV)驅動給定miRNA的表達以恢復其在體內活性的用途在肝細胞癌和肺癌(KasinskiSlack,2012；Kota等，2009)以及脊髓和延髓肌肉萎縮(Miyazaki等，2012)小鼠模型中顯示出是有效的，但是一直未對使用基于未制劑的合成寡核苷酸的方法以增加miRNA的水平進行很好的探索。

已對微RNA-29(miR-29)家族調節細胞外基質蛋白的能力進行了很好的表征(He等，2013)。該家族由miR-29a、-29b和-29c組成，其以兩個雙順反子簇的形式表達(miR-29a/-29b-1和miR-29b-2/-29c)，并且在序列上具有較高同源性，不同成員之間僅在成熟miRNA的3’區內存在少量錯配(van Rooij等，2008)。在不同類型的組織纖維化中所有三個成員均是減少的，并且針對心臟(van Rooij等，2008)、腎臟(Qin等，2011；Wang等，2012；Xiao等，2012)、肝臟(Roderburg等，2011；Sekiya等，2011；Zhang等，2012)、肺(Cushing等，2011；Xiao等，2012)和系統性硬化癥(Maurer等，2010)均已顯示出增加miR-29水平的治療益處。

在本領域中存在對能夠在體內有效增加miR-29活性的miR-29合成寡核苷酸模擬物的需求。此類miR-29模擬物或miR-29promiR對于治療多種組織纖維化狀況是有用的。

發明概述

本發明部分地基于可以將具有針對穩定性和細胞攝取的修飾的miRNA模擬物用于復制miR-29的內源性功能的發現。例如，在肺纖維化的情況下，使用miR-29b模擬物的治療性治療使博來霉素誘導的miR-29減少恢復并且阻止和逆轉肺纖維化，這與在疾病過程中被誘導的miR-29靶基因的抑制相吻合。類似地，使用miR-29b模擬物治療皮膚切口下調細胞外基質基因和參與纖維化過程的其他基因的表達。因此，本發明提供了雙鏈RNA miR-29模擬化合物。