[發(fā)明專利]用于預(yù)防和/或治療ERBB1陽性癌癥的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580057135.4
• 申請日: 2015-08-20
• 公開（公告）號: CN107075490A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張?jiān)郎?/a>;楊璐;李耘;阿勒普·巴塔查里亞
• 申請（專利權(quán)）人: 健康研究公司
• 主分類號: C12N9/48
• 分類號: C12N9/48;G01N33/573;G01N33/68
• 代理公司: 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11201
• 代理人: 宋融冰

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求2014年8月20日提交的現(xiàn)在未決的美國臨時申請No.62/039,497的優(yōu)先權(quán)，其公開內(nèi)容通過引用并入本文。

技術(shù)領(lǐng)域

表皮生長因子受體(EGFR)也稱為ErbB1或HER-1，是在多種細(xì)胞應(yīng)答中起主要作用的細(xì)胞表面受體。其為四個密切相關(guān)的受體酪氨酸激酶：ErbB1、ErbB2(HER-2)、ErbB3(HER-3)、ErbB4(HER-4)的成員。與這些受體的胞外域結(jié)合的配體導(dǎo)致同二聚化或異二聚化，隨后是參與一系列細(xì)胞事件的受體酪氨酸磷酸化和許多信號蛋白的磷酸化/激活。ErbB受體下游的關(guān)鍵信號通路包括PI3K/AKT/mTOR通路、Ras/Raf/ERK通路和JAK/STAT通路。ErbB的激活導(dǎo)致提高的DNA合成、細(xì)胞生長、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化和細(xì)胞遷移，這或許在癌細(xì)胞中最清楚地顯示。實(shí)際上，ErbB受體已成為癌癥治療的主要藥物靶點(diǎn)。已知ErbB受體的激酶結(jié)構(gòu)域的過表達(dá)或激活突變與多種癌癥相關(guān)聯(lián)。

ErbB1在其激酶結(jié)構(gòu)域中的過表達(dá)或激活突變發(fā)生在許多癌癥中，包括但不限于腦癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌和頭頸癌。多種ErbB1靶向藥物已經(jīng)上市，包括帕尼單抗(penitumumab)、西妥昔單抗、吉非替尼、厄洛替尼和阿法替尼(afatinib)。帕尼珠單抗(IgG2同種型)和西妥昔單抗(IgG1同種型)是單克隆抗體，而吉非替尼、厄洛替尼和阿法替尼是低分子量酪氨酸激酶抑制劑。然而，很多患者或者固有地對這些藥劑不敏感，或者發(fā)展了獲得性抗性。因此，對于開發(fā)靶向癌癥中的ErbB1的新治療方法存在持續(xù)的和未滿足的需要。本公開滿足了這一需求。

發(fā)明內(nèi)容

本公開提供可用于預(yù)防和/或治療ErbB1陽性癌癥的組合物和方法。組合物和方法部分地涉及以下發(fā)現(xiàn)：氨酰基脯氨酸二肽酶(prolidase)或肽酶D(本文稱為PEPD)是ErbB1受體的配體。然而，與描述了PEPD與ErbB1結(jié)合刺激ErbB1和癌細(xì)胞增殖的之前的報(bào)道(Yang等人,Prolidase directly binds and activates epidermal growth factor receptor and stimulates downstream signaling,J Biol Chem.2013年1月25日；288(4):2365-75)相反，本公開證明PEPD可用于抑制ErbB1+癌細(xì)胞的生長。特別地，本公開證明了快速PEPD-ErbB1結(jié)合誘導(dǎo)過表達(dá)ErbB1的癌細(xì)胞生長抑制，而最初刺激表達(dá)低或中等水平的ErbB1的癌細(xì)胞的生長(24小時治療)，但隨后抑制(24小時后)；參見例如圖5,6B)。此外，認(rèn)為本公開首次描述了與兩個ErbB1單體交聯(lián)的任何ErbB1配體。“交聯(lián)”是指兩個ErbB1單體同時與單個PEPD二聚體結(jié)合，但并不意味著ErB1二聚體彼此共價(jià)結(jié)合。

氨酰基脯氨酸二肽酶也稱為肽酶D(PEPD)、Xaa-Pro二肽酶或脯氨酸二肽酶或亞胺二肽酶，是水解在羧基末端具有脯氨酸或羥脯氨酸的二肽的蛋白酶。PEPD是廣泛表達(dá)的胞質(zhì)蛋白質(zhì)，并且作為同二聚體(人PEPD的單體分子量：54kD；如下文SEQ ID NO:1所示的493個氨基酸，其提供人氨酰基脯氨酸二肽酶的氨基酸序列)存在。在一些實(shí)施方案中，用于本公開的組合物和方法的PEPD是哺乳動物PEPD。在一個實(shí)施方案中，PEPD是人PEPD。在一些實(shí)施方案中，PEPD可以是酶活性的或具有降低的或不具有可檢測的酶活性。

用于本文公開的方法的組合物包含含有分離和/或純化的PEPD或重組和/或修飾的PEPD的藥物制劑，并且還可以包含另外的試劑，例如抗凝血劑。在一些實(shí)施方案中，PEPD是修飾的。在一些實(shí)施方案中，PEPD是融合蛋白的組分。在一些實(shí)施方案中，融合蛋白包含PEPD和可用于純化重組產(chǎn)生的PEPD的氨基酸序列。

所述方法包括向需要預(yù)防和/或治療ErbB1陽性癌癥的個體施用包含本公開的PEPD的組合物，并且還可以包括向個體施用抗凝血劑。還提供了用于鑒定需要用PEPD制劑治療的個體的方法以及為這些個體生成治療方案的方法。