[發明專利]核酸提純盒

有效

• 申請號: 201580054835.8
• 申請日: 2015-09-02
• 公開（公告）號: CN106999928B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: F·貝尼特茲波拉斯;J·佩雷加戈麥斯
• 申請（專利權）人: 統計診斷與創新有限公司
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;C12N15/10
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 范莉

本文公開了一種微流體裝置，該微流體裝置有封閉腔室，該封閉腔室包含用于從復雜生物試樣中提純生物或化學分析物的過濾器，所述腔室除了所述過濾器之外還容納有多個口部，如下所述：第一口部，該第一口部使得腔室能夠通過第一流動通路而與真空發生器氣體連通；第二口部，該第二口部使得腔室能夠通過第二流動通路而與一個或多個儲存器液體連通；第三口部，該第三口部使得腔室能夠通過第三流動通路而與一個或多個接收容器和真空發生器都氣體和液體連通；以及過濾器，該過濾器布置在第三口部以及第一和第二口部之間，這樣，通過第一和/或第二口部進入腔室和通過第三口部離開腔室的流體流過該過濾器。本發明還涉及一種使用該微流體裝置的方法。

技術領域

本發明涉及一種核酸提純盒。

背景技術

基于DNA和RNA對于二氧化硅表面的親和力(固相吸附)的初始核酸提純方法由Boom等人介紹。通過高濃度的離液鹽(通常為異硫氰酸胍或鹽酸胍)將促進二氧化硅表面的核酸吸引。Boom的方法使用離液鹽溶液來使生物試樣變性，并使得它利用離心力而通過過濾器，以便促進DNA和RNA吸附至二氧化硅表面上。一旦核酸結合在過濾器上，就用乙醇緩沖劑進行一次或多次洗滌，以便除去離液鹽和其它生物雜質，同時保持核酸結合(離液鹽在下游應用中對于大部分核酸都是破壞性的)。作為最終步驟，在除去乙醇(通過高速旋轉)后，核酸需要使用洗提緩沖液(水或低鹽緩沖液)來再水合。再水合促進了DNA和RNA從二氧化硅表面的脫開，且最終的旋轉產生了溶液，提純的核酸重新懸浮在該溶液中。

這種方案的變化形式在其它地方介紹，使用離心力或真空作為液體流動驅動力。不過，所有這些方法都相當復雜和費時間，包括多個移液步驟和隨后應用不同的驅動力來控制液體流動，這通常在重復提純工藝之間產生較高的產量變化。

例如，在人工實施通過真空的提純方案時，提純處理包括5個主要步驟，這5個主要步驟對應于5個不同的液體流過二氧化硅過濾器，即：包含核酸、洗滌緩沖液1和洗滌緩沖液2的試樣混合物，用于清洗過濾器，并消除任何量的污染物；空氣，用于干燥過濾器和消除任何揮發性污染物的痕跡；以及洗提緩沖液，用于從過濾器上釋放核酸，因此，NAs可進一步用于下游用途(例如qPCR放大和檢測)。在各步驟結束時，甚至在一定容積的液體流過過濾器之后還保持真空吸力1或2分鐘，以便保證在下一次液體移液之前幾乎沒有液體留在過濾器裂縫內。

核酸生產的可復制性取決于對試樣和緩沖液與過濾器的接觸時間以及液體流的量和分布進行復制的可能性，這取決于操作人員的技能。

因此，本發明的目的是提供一種提純裝置，該提純裝置提供了獨立于各操作人員的、可復制的提純結果。

這通過一種用于從復雜生物試樣中提純生物或化學分析物的微流體裝置和方法而實現。該微流體裝置包括：腔室，過濾器嵌入該腔室中；多個儲存器；以及閥。所述裝置能夠與外部泵交接，該外部泵通過自動儀器來操作。因此，這里的裝置和方法提供了傳統核酸提純方法的端對端的自動實施方式。

發明內容

本發明涉及一種微流體裝置，該微流體裝置有封閉腔室，該封閉腔室包含用于從復雜生物試樣中提純生物或化學分析物的過濾器，所述腔室除了所述過濾器之外還容納有多個口部，如下所述：第一口部，該第一口部使得腔室能夠通過第一流動通路而與真空發生器進行氣體連通；第二口部，該第二口部使得腔室能夠通過第二流動通路而與一個或多個儲存器進行液體連通；第三口部，該第三口部使得腔室能夠通過第三流動通路而與一個或多個接收容器和真空發生器都進行氣體和液體連通；以及過濾器，該過濾器布置在第三口部以及第一和第二口部之間，這樣，通過第一和/或第二口部進入腔室和通過第三口部離開腔室的流體流過該過濾器。