[發明專利]細胞的血小板靶向微流體分離

有效

• 申請號: 201580054400.3
• 申請日: 2015-08-07
• 公開（公告）號: CN106796164B
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發明（設計）人: M.托納;S.斯托特;E.雷亞泰吉;姜曉成
• 申請（專利權）人: 通用醫療公司
• 主分類號: G01N1/18
• 分類號: G01N1/18;G01N1/40;G01N33/48;G01N33/49;G01N33/543;G01N33/569;G01N33/574
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝

1.一種用于從樣品流體分離血小板相關的有核靶細胞的方法，所述方法包括：

獲得細胞捕獲室，所述細胞捕獲室含有結合至所述室的一個或多個壁的多個結合部分，其中所述結合部分與血小板特異性結合；

在使所述樣品流體流過所述細胞捕獲室之前使用血小板抑制劑處理所述樣品流體，其中所述血小板抑制劑抑制未結合的血小板粘附至其他細胞；

在使所述結合部分與所述樣品流體中的任意血小板相關的有核靶細胞結合的條件下使所述樣品流體流過所述細胞捕獲室以形成復合物；以及

從所述復合物分離和收集血小板相關的有核靶細胞，從而從所述樣品流體分離所述血小板相關的有核靶細胞；

其中所述血小板相關的有核靶細胞包括循環上皮細胞、循環腫瘤細胞(CTC)、循環內皮細胞(CEC)、循環干細胞(CSC)、中性粒細胞和巨噬細胞的任意一種或多種；且

其中所述其他細胞包括血小板、紅細胞和白細胞的任意一種或多種。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述樣品流體包括生物流體。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述血小板抑制劑包括茶堿、腺苷、雙嘧達莫、阿加曲班或前列腺素I2。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述結合部分包含與血小板特異性結合的抗體。

5.根據權利要求1所述的方法，所述方法還包括在使所述樣品流體流過所述細胞捕獲室之前，從所述樣品流體中選擇性地除去未結合的血小板，同時保持在所述樣品流體中的血小板相關的有核靶細胞。

6.根據權利要求5所述的方法，其中在微流體裝置中進行血小板消除，所述微流體裝置包含含有微柱陣列的通道以執行確定性側向位移。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述微柱排布成多行，其中所述微柱在行內間隔開30微米至60微米的距離，隨后的行與前一行間隔開5微米至15微米的距離，并且其中在每個隨后的行中的所述微柱與在前一行中的微柱之間橫向偏移的距離小于所述行內的所述微柱間的間隔。

8.根據權利要求5所述的方法，其中在微流體裝置中使用離心力或慣性力或者這兩者進行所述血小板消除。

9.根據權利要求5所述的方法，其中通過密度梯度離心進行血小板消除。

10.根據權利要求6所述的方法，其中所述細胞捕獲室和所述微流體裝置均位于單一基底上。

11.根據權利要求6所述的方法，其中所述細胞捕獲室和所述微流體裝置位于分離的基底上并且經由導管流體連接。

12.根據權利要求1所述的方法，其中所述細胞捕獲室包含在其內表面上排布的多個人字形結構以便在所述樣品流體內產生微渦流。

13.根據權利要求1所述的方法，其中所述結合部分結合至包含結合對的第一構件的納米結構，其中所述細胞捕獲室的一個或多個內表面結合至使用所述結合對的多個第二構件官能化的明膠層，且其中所述納米結構通過所述結合對的第一和第二構件的結合相互作用結合至所述明膠的頂層。

14.根據權利要求13所述的方法，其中所述血小板相關的有核靶細胞通過所述結合部分結合至所述納米結構，并且通過在升高的溫度下熔化所述明膠從所述明膠釋放所述納米結構分離所述血小板相關的有核靶細胞。

15.根據權利要求13所述的方法，其中所述血小板相關的有核靶細胞通過所述結合部分結合至所述納米結構，并且通過對所述明膠層施加局部剪切應力從所述明膠釋放所述納米結構分離所述血小板相關的有核靶細胞。