[發明專利]檢測假性過敏藥物反應和鑒別阻斷劑以預防不良反應的基于MRGPRX2/MRGPRB2表達細胞的試驗

有效

• 申請號: 201580053612.X
• 申請日: 2015-07-31
• 公開（公告）號: CN107002087B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: X·董;B·麥克尼爾
• 申請（專利權）人: 約翰·霍普金斯大學
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/85;C07K14/705;A61K31/7088;G01N35/00;A61P37/08
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.一種分離細胞，包含表達mas相關G蛋白偶聯受體成員X2，即MrgprX2，或MrgprB2的重組核酸，以及表達GTP結合蛋白α15，即Gα15，的重組核酸。

2.如權利要求1所述的分離細胞，其中，該重組核酸表達MrgprX2。

3.如權利要求1所述的分離細胞，其中，該重組核酸表達MrgprB2。

4.如權利要求2所述的分離細胞，其中，該表達MrgprX2的重組核酸包含一個或多個突變。

5.如權利要求2所述的分離細胞，其中，該一個或多個突變產生不能活化信號轉導通道的MrgprX2蛋白。

6.如權利要求3所述的分離細胞，其中，該表達MrgprB2的重組核酸包含一個或多個突變。

7.如權利要求3所述的分離細胞，其中，該一個或多個突變產生不能活化信號轉導通道的MrgprB2蛋白。

8.如權利要求1所述的分離細胞，其中，該分離細胞包含人類胚胎腎293細胞，即HEK293。

9.一種MrgprB2或MrgprX2拮抗劑制備用于減輕對象體內通過給藥化合物而誘發的假性過敏型反應嚴重性的藥劑的用途。

10.如權利要求9所述的用途，其中，該拮抗劑包含抗體或其片段。

11.如權利要求9所述的用途，其中，該拮抗劑包含結合蛋白。

12.如權利要求9所述的用途，其中，該拮抗劑包含多肽。

13.如權利要求9所述的用途，其中，該拮抗劑包含小分子。

14.如權利要求9所述的用途，其中，該拮抗劑包含核酸分子。

15.如權利要求14所述的用途，其中，該核酸分子包含雙鏈核糖核酸，即dsRNA、小發夾RNA或短發夾RNA，即shRNA、或反義RNA、或其任意部位。

16.如權利要求9所述的用途，其中，所述拮抗劑在給藥該化合物之前、同時或之后給藥至該對象。

17.如權利要求9所述的用途，其中，該拮抗劑是外用給藥、口服給藥、經吸入給藥或經注射給藥。

18.一種MrgprB2或MrgprX2拮抗劑制備用于治療對象體內假性過敏型反應的藥劑的用途。

19.一種確定化合物是否誘發假性過敏型反應的方法，該方法包含：

令如權利要求1所述的分離細胞與備選化合物接觸，

檢測MrgprX2或MrgprB2的活化，其中，MrgprX2或MrgprB2的活化決定該備選化合物誘發了假性過敏型反應。

20.如權利要求19所述的方法，其中，MrgprX2或MrgprB2的活化由鑒別細胞內鈣的增加而檢測。

21.如權利要求19所述的方法，其中，該備選化合物選自由亮丙瑞林、戈舍瑞林、組氨瑞林、曲普瑞林、西曲瑞克、加尼瑞克、地加瑞克、奧曲肽、蘭瑞肽、帕瑞肽、舍莫瑞林、替莫瑞林、艾替班特、醋酸格拉替雷、特立帕肽、普蘭林肽、博來霉素、艾塞那肽、胰高血糖素、利拉魯肽、恩夫韋地、和粘桿菌素所組成的群組。

22.如權利要求19所述的方法，其中，該備選化合物選自由琥珀酰膽堿、筒箭毒堿、阿曲庫銨、美維庫銨、和羅庫溴銨組成的群組。

23.一種鑒別MrgprX2或MrgprB2拮抗劑的方法，包含：

令如權利要求1所述的分離細胞與誘發假性過敏型反應的化合物接觸，

令如權利要求1所述的分離細胞與備選拮抗劑接觸，

檢測MrgprX2或MrgprB2的活化，其中，該MrgprX2或MrgprB2的活化相對于不存在該化合物的情況下該MrgprX2或MrgprB2的活化的降低決定了該備選化合物是拮抗劑。