[發明專利]細胞膜穿透肽及其作為生物活性物質傳遞體的用途

有效

• 申請號: 201580053490.4
• 申請日: 2015-08-27
• 公開（公告）號: CN106795205B
• 公開（公告）日: 2020-08-21
• 發明（設計）人: 李周衡;徐昌歡;金主烈;金相旭
• 申請（專利權）人: 迪沃勢股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K47/42;A61K47/64;A61K8/64;A61Q19/00
• 代理公司: 北京冠和權律師事務所 11399
• 代理人: 朱健

本發明作為涉及穿透細胞膜的新的肽的發明，是涉及肽傳遞體的發明，所述新的肽能夠使得難以穿透真核細胞的細胞膜而傳遞至細胞內的物質通過多種結合向真核細胞內部傳遞，所述肽傳遞體能夠使得作為在來源于人類的氨基酸序列中探索到的肽穿透細胞膜從而向細胞內有效傳遞多種生物活性物質。將通過探索發現的細胞膜穿透肽與蛋白質及核酸進行結合，從而確認向細胞內部傳遞的效能，并且確認其與現有的細胞穿透肽R9肽相比具有優秀的效能。期待通過本發明有助于利用難以向細胞內部傳遞從而無法被利用的多種生物活性物質的醫藥品、化妝品及功能性產品等的開發及利用。

技術領域

本發明涉及穿透細胞膜的新的肽(peptide)，所述新的肽能夠使得難以穿透真核細胞的細胞膜而傳遞至細胞內的物質通過多種結合向細胞內部傳遞，從在蜂毒素肽(melitinpeptide)的細胞膜溶解作用中起到中樞作用的蜂毒素肽C-末端氨基酸序列，將類似的氨基酸序列從人類蛋白質的氨基酸序列中進行探索并開發。所開發的肽作為起到穿透細胞膜從而向細胞內部有效地傳遞多種生物活性物質的傳遞體的作用的肽，期待通過本發明使得難以向細胞內部傳遞從而無法用作有益于人類的物質且難以開發的多種生物活性物質有效地向生物體內傳遞，并且期待大有裨益于將其用于醫藥品、化妝品及功能性產品等對人類有益的產品的開發及利用。

背景技術

真核細胞的細胞膜是一種單體，其由雙重脂質膜形成，對細胞內部物質進行保護，并對物質從外部流入或內部物質的移動進行控制。尤其，就類似于生物體內活性物質的核酸的親水性物質，或類似于蛋白質、肽的尺寸較大且具有表面電荷的分子的細胞內流入而言，不是與類似于細胞膜表面的受體的特定物質的組織化且體系化的機制幾乎不可能是廣為人知的。因此，至今開發的藥物的幾乎大部分以細胞表面的物質而非細胞內部物質作為開發對象，由此如果開發出能夠使得這樣的親水性物質或尺寸較大的物質有效地向細胞內部傳遞的傳遞體，則能夠以尚未開發的無數的細胞內物質為對象開發有用的新藥物或產品。

在細胞內部起到作用的無數的物質因缺乏或變形而無法正常發揮功能，治療這樣的疾病的最簡單接近的方法是重新補充不足且變形的生物體物質。但是因為細胞膜這樣的屏障，將尺寸較大的生物體分子向細胞內部傳遞時受到限制，由此對傳遞體開發的要求從很早開始就存在了，所述傳遞體能夠向細胞內部傳遞物質。以此背景為基礎所開發的細胞膜穿透肽是蛋白轉導域(protein transduction domain；PTD)或細胞穿透肽(Cell-penetrating peptides；CPPs)。

1988年存在HIV-1(Human immunodeficiency virus，type1；人類免疫缺陷病毒1型)Tat蛋白質能夠導入至哺乳類細胞的最初報告，針對將物質向細胞內部傳遞的傳遞體的研究得到了活躍地展開(文獻1)。之后將肽命名為PTD或CPPs，從而開發無數的新細胞膜穿透肽，所述肽由20個左右的較短氨基酸組成，能夠穿透細胞膜從而向細胞內部傳遞物質。作為代表性的PTD，有從HIV-1Tat蛋白質發現的Tat-PTD(文獻2、3)(Tat_49-57，序列：RKKKRRQRRR)、來自于果蠅觸角基因同源結構域(Antennapedia homeodomain)蛋白質的Antp(文獻4)(觸角足基因(Antennapedia)_43-58,序列：RQIKIWFQNRRMKWKK)、來自于HSV-1(Herpessimplexvirustype1，單純皰疹病毒1型)VP22蛋白質的VP22(文獻5)(VP22_267-300，序列：DAATATRGRSAASRPTERPRAPARSASRPRRPVE)、從人工序列開發的寡聚精氨酸(Poly-arginine)(R9，RRRRRRRRR)等，這些肽的共通的特征在于，以較高的比例構成有陽離子性氨基酸。