[發明專利]含有修飾核酸堿基的靶核酸的測定方法及試劑盒

在審

• 申請號: 201580052531.8
• 申請日: 2015-09-28
• 公開（公告）號: CN107075505A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 松野達樹;堀池麻里子
• 申請（專利權）人: 富士瑞必歐株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12Q1/68;G01N33/53;G01N33/543;C07K16/00
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所11105
• 代理人: 張濤

1.一種含有修飾核酸堿基的靶核酸的測定方法，其包括：

(1)將核酸樣品及修飾核酸堿基配對性異源核酸探針在溶液中進行孵育；以及

(2)在(1)中得到的溶液中，使用針對于異源配對性修飾核酸堿基的抗體對修飾核酸堿基進行測定。

2.如權利要求1所述的方法，其中，核酸樣品包含含有修飾核酸堿基的靶核酸，且工序(1)及(2)分別通過(1’)及(2’)來進行：

(1’)在溶液中通過孵育使包含含有修飾核酸堿基的靶核酸的核酸樣品、及修飾核酸堿基配對性異源核酸探針進行反應，形成由所述靶核酸及所述探針構成的異源核酸雜交體；以及

(2’)在含有所述異源核酸雜交體的溶液中，使用所述抗體對修飾核酸堿基進行測定。

3.如權利要求1或2所述的方法，其還包括：

在含有所述核酸樣品的溶液中添加所述探針，制備含有所述核酸樣品及所述探針這兩者的溶液。

4.如權利要求1～3中任一項所述的方法，其中，所述核酸樣品包含含有修飾核酸堿基的靶DNA。

5.如權利要求1～4中任一項所述的方法，其中，所述探針包含下述人工核酸，所述人工核酸具有與靶核酸的主鏈結構不同的主鏈結構。

6.如權利要求5所述的方法，其中，所述探針為肽核酸(PNA)探針或交聯型核酸(BNA)探針。

7.如權利要求1～6中任一項所述的方法，其中，構成修飾核酸堿基的核酸堿基為胞嘧啶。

8.如權利要求1～7中任一項所述的方法，其中，修飾核酸堿基為甲基胞嘧啶。

9.一種含有修飾核酸堿基的靶核酸的測定方法，其包括：

(1)在溶液中對核酸樣品、修飾核酸堿基配對性異源導向探針、及捕捉探針進行孵育；以及

(2)在(1)中得到的溶液中，使用針對于異源配對性修飾核酸堿基的抗體對修飾核酸堿基進行測定。

10.如權利要求9所述的方法，其中，核酸樣品包含含有修飾核酸堿基的靶核酸，且工序(1)及(2)分別通過(1’)及(2’)來進行：

(1’)在溶液中通過孵育使核酸樣品、修飾核酸堿基配對性異源導向探針、及捕捉探針進行反應，形成由所述靶核酸、所述導向探針及捕捉探針構成的異源核酸雜交體；以及

(2’)在含有所述異源核酸雜交體的溶液中，使用所述抗體對修飾核酸堿基進行測定。

11.如權利要求10所述的方法，其中，所述導向探針相對于所述靶核酸為異源，捕捉探針相對于所述靶核酸及所述導向探針這兩者為異源。

12.如權利要求1～11中任一項所述的方法，其中，含有修飾核酸堿基的靶核酸的測定使用所述抗體通過ELISA來進行。

13.一種含有修飾核酸堿基的靶核酸的測定用試劑盒，其包含：

(I)修飾核酸堿基配對性異源核酸探針；及

(II)針對于異源配對性修飾核酸堿基的抗體。

14.如權利要求13所述的測定用試劑盒，其中，所述探針為修飾核酸堿基配對性異源導向探針，且進一步含有(III)捕捉探針。