[發明專利]無熱量甜味劑及合成方法有效
| 申請號： | 201580051860.0 | 申請日： | 2015-10-02 |
| 公開（公告）號： | CN106714578B | 公開（公告）日： | 2020-07-28 |
| 發明（設計）人： | 毛國紅;X·于 | 申請（專利權）人： | 康納根有限公司 |
| 主分類號： | A23L27/30 | 分類號： | A23L27/30;C12P19/56;C07H15/24 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 黃登高 |
| 地址： | 美國馬*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 熱量 甜味劑 合成 方法 | ||
1. 一種由甜茶苷合成甜菊苷和萊鮑迪苷KA的混合物的方法，所述方法包括：
制備反應混合物，所述反應混合物包含甜茶苷，選自蔗糖、尿苷二磷酸(UDP)和尿苷二磷酸-葡萄糖(UDP-葡萄糖)的底物，選自具有SEQ ID NO: 3的序列的EUGT11和具有SEQ IDNO: 11的序列的UDP-糖基轉移酶融合酶的UDP-糖基轉移酶；以及
溫育所述反應混合物足夠時間以生成甜菊苷和萊鮑迪苷KA的混合物，其中葡萄糖共價偶聯至甜茶苷的C2’-19-O-葡萄糖以生成萊鮑迪苷KA，并且葡萄糖共價偶聯至甜茶苷的C2’-13-O-葡萄糖以生成甜菊苷。
2.根據權利要求1所述的方法，其還包括向所述反應混合物中添加蔗糖合成酶。
3.根據權利要求2所述的方法，其中所述蔗糖合成酶選自擬南芥蔗糖合成酶1；擬南芥蔗糖合成酶3；和綠豆蔗糖合成酶。
4.根據權利要求3所述的方法，其中所述蔗糖合成酶為阿拉伯芥蔗糖合成酶1。
5.根據權利要求1所述的方法，其中所述UDP-糖基轉移酶為UDP-糖基轉移酶融合酶。
6.根據權利要求5所述的方法，其中所述UDP-糖基轉移酶融合酶包含阿拉伯芥蔗糖合成酶1結構域。
7. 一種由甜茶苷合成萊鮑迪苷KA的方法，所述方法包括：
制備反應混合物，所述反應混合物包含甜茶苷，選自蔗糖、尿苷二磷酸(UDP)和尿苷二磷酸-葡萄糖(UDP-葡萄糖)的底物；及具有SEQ ID NO: 5的序列的HV1；以及
溫育所述反應混合物足夠時間以生成萊鮑迪苷KA，其中葡萄糖共價偶聯至甜茶苷的C2’-19-O-葡萄糖以生成萊鮑迪苷KA。
8.根據權利要求7所述的方法，其還包括向所述反應混合物中添加蔗糖合成酶。
9.根據權利要求8所述的方法，其中所述蔗糖合成酶選自擬南芥蔗糖合成酶1；擬南芥蔗糖合成酶3；和綠豆蔗糖合成酶。
10.根據權利要求9所述的方法，其中所述蔗糖合成酶為阿拉伯芥蔗糖合成酶1。
11. 一種由甜茶苷合成萊鮑迪苷G的方法，所述方法包括：
制備反應混合物，所述反應混合物包含甜茶苷，選自蔗糖、尿苷二磷酸(UDP)和尿苷二磷酸-葡萄糖(UDP-葡萄糖)的底物，選自具有SEQ ID NO: 1的序列的UGT76G1和具有SEQ IDNO: 9的序列的UDP-糖基轉移酶融合酶的UDP-糖基轉移酶；以及
溫育所述反應混合物足夠時間以生成萊鮑迪苷G，其中葡萄糖共價偶聯至甜茶苷的C3’-13-O-葡萄糖以生成萊鮑迪苷G。
12.根據權利要求11所述的方法，其還包括向所述反應混合物中添加蔗糖合成酶。
13.根據權利要求12所述的方法，其中所述蔗糖合成酶選自擬南芥蔗糖合成酶1；擬南芥蔗糖合成酶3；和綠豆蔗糖合成酶。
14.根據權利要求13所述的方法，其中所述蔗糖合成酶為阿拉伯芥蔗糖合成酶1。
15.根據權利要求11所述的方法，其中所述反應混合物包含UDP-糖基轉移酶融合酶。
16.根據權利要求15所述的方法，其中所述UDP-糖基轉移酶融合酶包含阿拉伯芥蔗糖合成酶1結構域。
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