[發明專利]用于確定患者特定突變的藥物反應的方法

有效

• 申請號: 201580050632.1
• 申請日: 2015-07-20
• 公開（公告）號: CN106715719B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 加比·塔爾希克;約拉姆·阿爾特舒勒
• 申請（專利權）人: 福爾生物治療有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6897;C12N15/18;C12N15/62;A61P35/02;A61P35/04
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 李平;鄭霞

1.攜帶包含一種或更多種患者特定突變的人工合成的測試基因的第一組測試表達構建體、人工合成的相應的野生型基因的第二組對照表達構建體以及包含嵌合的熒光易位報告物(FTR)基因的表達載體在制備用于鑒定能夠抑制一種或更多種患者特定突變的作用的藥物的產品中的用途，所述嵌合的熒光易位報告物(FTR)基因包含連接至報告物基因部分的靶基因部分，其中所述靶基因部分編碼受所述測試基因影響的信號傳送途徑中的蛋白，并且當所述產品被使用時，包括以下步驟：

a)形成攜帶包含一種或更多種患者特定突變的人工合成的測試基因的所述第一組測試表達構建體及人工合成的相應的野生型基因的所述第二組對照表達構建體的可尋址陣列；

b)向所述陣列中的每個位點添加包含嵌合的熒光易位報告物(FTR)基因的所述表達載體；

c)將活的測定細胞在使得所述表達構建體和所述表達載體轉染進入所述測定細胞的條件下添加至每個位點，其中每個測定細胞共表達測試表達構建體或其相應的野生型的對照表達構建體，和FTR；

d)比較在所述藥物的存在和不存在下表達包含所述一種或更多種患者特定突變的基因的測定細胞與表達相應的野生型基因的測定細胞中表達的FTR的至少一個屬性；

其中在藥物的存在和不存在下表達包含所述一種或更多種突變的基因和/或表達所述相應的野生型基因的測定細胞之間的不同結果指示能夠抑制所述患者特定突變的作用的藥物。

2.根據權利要求1所述的用途，其中所述藥物是抗癌藥物。

3.根據權利要求1所述的用途，其中在所述產品使用時包括伴隨地或順序地添加多于一種藥物。

4.根據權利要求1所述的用途，其中在所述產品使用時包括添加不同濃度的藥物以確定所述藥物反應。

5.根據權利要求1所述的用途，其中所述FTR的屬性選自熒光蛋白的定位和熒光蛋白的易位。

6.根據權利要求5所述的用途，其中所述定位包括選自以下的亞細胞定位：胞質溶膠、細胞核、核仁、質膜、內質網(ER)、線粒體、高爾基體、溶酶體、過氧化物酶體、內體區室和細胞骨架。

7.根據權利要求1所述的用途，其中所述FTR的所述靶基因部分編碼選自以下的蛋白：腫瘤抑制因子、細胞骨架蛋白、生長因子受體、G-蛋白偶聯受體、細胞粘附蛋白、蛋白激酶、轉錄因子、銜接體蛋白質和交換因子。

8.根據權利要求1所述的用途，其中所述FTR的所述報告物基因部分編碼熒光標志物。

9.根據權利要求1所述的用途，其中所述患者是癌癥患者。

10.根據權利要求1所述的用途，其中所述突變是致癌突變。

11.根據權利要求1所述的用途，其中所述第一和/或第二組表達構建體攜帶基因的一部分。

12.根據權利要求1所述的用途，其中所述第一和/或第二組表達構建體包含雙鏈線性DNA。

13.根據權利要求1所述的用途，其中所述第一和/或第二組表達構建體的啟動子是誘導型啟動子或組成型啟動子。

14.根據權利要求1所述的用途，其中在所述產品使用時還包括在不存在轉染試劑的情況下在固體支持體上干燥所述表達構建體。

15.根據權利要求1所述的用途，其中步驟c)在步驟a)和/或步驟b)之前。