[發明專利]能改變果實大小的方法和材料

在審

• 申請號: 201580048787.1
• 申請日: 2015-09-03
• 公開（公告）號: CN107075500A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 安德魯·彼得·格利夫;姚家龍
• 申請（專利權）人: 新西蘭植物和食品研究院有限公司
• 主分類號: C12N15/05
• 分類號: C12N15/05;C12N15/82;A01H4/00;A01H5/08
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司11112
• 代理人: 王靜,張珂珂

1.一種用于以下中的至少一者的方法：

a)改變由植物產生的果實的尺寸，

a)產生改變尺寸的果實，和

b)產生具有改變尺寸的果實的植物，

所述方法包括改變產生所述果實的植物中miRNA172的表達或活性。

2.權利要求1所述的方法，其中改變包括增大或減小果實的尺寸。

3.權利要求1所述的方法，其中改變包括增加或降低miRNA172的表達或活性。

4.權利要求1所述的方法，其中通過利用編碼miRNA172的多核苷酸轉化所述植物來增加miRNA172的表達或活性。

5.權利要求4所述的方法，其中所述編碼miRNA172的多核苷酸有效連接于啟動子序列。

6.權利要求5所述的方法，其中所述啟動子相對于編碼miRNA172的多核苷酸是異源的。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述植物來自于其中果肉源自萼筒組織的物種，并且其中所述miRNA172的表達或活性增加，并且所述果實的尺寸減小。

8.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中所述植物來自于其中果肉源自萼筒組織的物種，并且其中所述miRNA172的表達或活性降低，并且所述果實的尺寸增大。

9.一種鑒定具有表現出產生改變尺寸的果實的基因型的植物的方法，所述方法包括對植物測試以下中的至少一者：

a)至少一種miRNA172的表達改變，

b)至少一種miRNA172基因的表達改變，

c)存在與至少一種miRNA172的表達改變相關的標記，

d)存在與至少一種miRNA172基因的表達改變相關的標記。

10.權利要求9所述的方法，其中a)至d)中的任一者表明所述植物將產生改變尺寸的果實。

11.權利要求9所述的方法，其包括培養所鑒定的植物的額外步驟。

12.權利要求9所述的方法，其包括由所鑒定的植物進行育種的額外步驟。

13.根據權利要求9至12中任一項所述的方法，其中所述植物來自于其中果肉源自萼筒組織的物種，并且其中所述miRNA172的表達增加，并且所述果實的尺寸減小。

14.根據權利要求9至12中任一項所述的方法，其中所述植物來自于其中果肉源自萼筒組織的物種，并且其中所述miRNA172的表達降低，并且所述果實的尺寸增大。

15.一種用于增加植物中至少一種miRNA172或miRNA172基因的表達的構建體。

16.權利要求15所述的構建體，其包含與編碼miRNA172的序列有效連接的啟動子序列。

17.權利要求16所述的構建體，其中所述構建體中的所述啟動子相對于編碼miRNA172的序列是異源的。

18.一種用于降低或消除植物中至少一種miRNA172或miRNA172基因的表達的構建體。

19.權利要求18所述的構建體，其包含有效連接至miRNA172基因的至少一部分的啟動子序列。

20.權利要求19所述的構建體，其中所述基因的所述部分相對于所述啟動子序列處于反義方向，并且形成用于RNAi沉默的發夾結構的一部分。

21.權利要求18所述的構建體，其包含與編碼miRNA172的突變靶位點(靶模擬物)的序列連接的啟動子。

22.權利要求21所述的構建體，其中所述靶模擬物包含相對于目標內源性miRNA172的至少一個錯配。

23.權利要求18所述的構建體，其是人工的miRNA-定向的抗miRNA構建體。

24.通過權利要求1至8中任一項所述的方法產生的尺寸改變的植物或果實。

25.權利要求24所述的植物或果實，其具有至少一種miRNA172的改變的表達。

26.包含權利要求15至23中任一項所述的構建體的植物或果實。