[發(fā)明專利]穩(wěn)定化的流感血凝素莖區(qū)三聚體及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201580041202.3
• 申請日: 2015-05-27
• 公開（公告）號: CN106715474B
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發(fā)明（設計）人: J.R.馬斯科拉;J.C.博英頓;H.M.亞辛;P.D.鄺;B.S.格拉哈姆;M.凱恩基約
• 申請（專利權(quán)）人: 美利堅合眾國;由健康及人類服務部部長代表
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K39/145;A61K39/295;A61P31/16
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝

1.包含流感血凝素(HA)蛋白和接頭肽的蛋白質(zhì)構(gòu)建體，其中所述HA蛋白缺乏頭部區(qū)氨基酸序列的至少95％并且所述接頭肽替換缺少的序列，其中所述接頭肽的長度小于10個氨基酸；且

其中所述HA蛋白包含：

a.與SEQ ID NO:8的氨基酸N403-W435對應的氨基酸區(qū)域的缺失；和

b.氨基酸殘基對中的取代，其中所述氨基酸殘基對在折疊的HA蛋白中相互作用并且對應于SEQ ID NO:149的K1和E53；且其中折疊的改變的蛋白質(zhì)中的氨基酸對之間的相互作用的強度大于折疊的野生型蛋白質(zhì)中的氨基酸對之間的相互作用強度；且

其中所述蛋白質(zhì)構(gòu)建體由SEQ ID NO:80,83,86,89,92,95,98,101,104,158,164,170,176,182,188,197,203,209,214,217,222,224,226,228,230,232,235,240,242,244,246,248,250,252,254,256,258,261,268,275,282,289,296,303,310,317,324,331,338,345,352,359,366,373,380,394或400中任一項所示的氨基酸序列組成。

2.權(quán)利要求1的蛋白質(zhì)構(gòu)建體，其由以SEQ ID NO:92所示的氨基酸序列組成。

3.核酸，其選自下組：

a)核酸分子，其編碼權(quán)利要求1或2的蛋白質(zhì)；和

b)與(a)的核酸分子完全互補的核酸分子。

4.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的蛋白質(zhì)構(gòu)建體，其中所述HA蛋白與自裝配的單體亞基蛋白連接以形成融合蛋白，其中所述融合蛋白自裝配成納米顆粒，使得在所述納米顆粒的表面上展示所述融合蛋白的HA部分。

5.權(quán)利要求4的蛋白質(zhì)構(gòu)建體，其中所述自裝配單體亞基是鐵蛋白或2,4-二氧四氫蝶啶合酶。

6.權(quán)利要求5的蛋白質(zhì)構(gòu)建體，其中所述自裝配單體亞基是鐵蛋白，并且包含以SEQ IDNO:5所示的氨基酸序列。

7.權(quán)利要求4的蛋白質(zhì)構(gòu)建體，其中所述融合蛋白包含以SEQ ID NO:107、110、113、116、119、122、125、128、131、161、167、173、179、185、191、200、206、212、215、220、223、225、227、229、231、233、238、241、243、245、247、249、251、253、255、257、259、264、271、278、285、292、299、306、313、320、327、334、341、348、355、362、369、376、383、390或397中任一項所示的氨基酸序列。

8.核酸分子，其選自下組：

a)核酸分子，其編碼權(quán)利要求4-7中任一項的融合蛋白；和

b)核酸分子，其與a)的核酸分子完全互補。

9.納米顆粒，其包含權(quán)利要求4-7中任一項的融合蛋白。

10.疫苗，其包含權(quán)利要求9的納米顆粒。

11.試劑盒，其包含權(quán)利要求9的納米顆粒。

12.權(quán)利要求9的納米顆粒，其中所述納米顆粒引發(fā)針對流感病毒血凝素蛋白的莖區(qū)的免疫應答。

13.權(quán)利要求9的納米顆粒，其中所述納米顆粒引發(fā)針對流感毒株的免疫應答，所述流感毒株對于獲得所述HA蛋白的流感病毒株是異源的。

14.權(quán)利要求9的納米顆粒，其中所述納米顆粒引發(fā)對流感毒株的免疫應答，所述流感毒株與獲得所述HA蛋白的流感病毒是抗原趨異的。